南極磷蝦高值成分的提取與分離.pdf

1、南極磷蝦（Euphausiasuperba）是一種生活在南極海域的甲殼類浮游動物。南極磷蝦含有油脂、蛋白、蝦青素和甲殼素等高值成分，具有很高的開發(fā)利用價值。然而，南極磷蝦的高氟、砷及其它重金屬元素含量是限制南極磷蝦資源開發(fā)的關(guān)鍵因素。目前，南極磷蝦油脂、蛋白和甲殼素等高值成分的分離提取多采用有機(jī)溶劑提取、機(jī)械脫殼或酶解以及強(qiáng)酸強(qiáng)堿法。這些方法都是針對南極磷蝦單一高值成分進(jìn)行分離，不能實(shí)現(xiàn)同時分離多個成分，且操作繁瑣，目標(biāo)產(chǎn)物損失率高。同

2、時，這些方法得到的產(chǎn)品中氟、砷及其它有害元素含量普遍較高。本文利用一種新型的多相鹽析萃取體系，可同時分離提取南極磷蝦油脂、蛋白和甲殼素等高值成分，再利用蛋白酶解法進(jìn)一步分離和利用南極磷蝦蛋白質(zhì)和甲殼素，同時大幅降低了南極磷蝦油脂和蛋白等終產(chǎn)物中有害元素的含量。
　　首先利用正己烷/乙醇(10∶1，w/w)混合溶劑在室溫下直接提取冷凍南極磷蝦油脂。接著利用檸檬酸鈉/檸檬酸混合液-乙醇-正己烷多相鹽析萃取體系進(jìn)一步提取分離提油后殘?jiān)?/p>

3、的高值成分。通過實(shí)驗(yàn)確定最佳的提取分離條件為:多相鹽析萃取體系組成為56.5％檸檬酸鈉/檸檬酸混合液（檸檬酸鈉/檸檬酸/水的質(zhì)量比為9∶1∶20.5）(w/w)-18.5％乙醇(w/w)-25％正己烷(w/w)，南極磷蝦殘?jiān)募尤肓繛?.5％(w/w)，混合時間為120min。該最優(yōu)條件下，磷蝦殘?jiān)写钟椭幕厥章蕿?4.7±0.5％，固相蛋白的回收率為58.6±1.7％，上相和中相的蝦青素回收率分別為24.1±0.6％和16.6±0.

4、6％。經(jīng)過兩次提取后，南極磷蝦的油脂提取率達(dá)到95％。同時，經(jīng)過多相鹽析萃取后，上相的氟、砷及其它重金屬含量大幅降低(≤1.3％)。將近70％的氟元素從磷蝦殘?jiān)忻撾x，進(jìn)入下相;不同比例的砷及其它重金屬元素進(jìn)入中相和下相中，固相的重金屬殘留量為24.1-55.1％。
　　其次，對混合溶劑提取與多相鹽析萃取的南極磷蝦油脂進(jìn)行分析和比較。分別測定了這兩種油脂的磷脂含量、酸值、游離脂肪酸含量、氟、砷以及其它重金屬元素的含量，同時運(yùn)用薄層

5、層析和氣相色譜分析兩種油脂的成分與脂肪酸組成。結(jié)果表明，這兩種油脂存在一定的差異。實(shí)驗(yàn)還發(fā)現(xiàn)，南極磷蝦油脂具有較強(qiáng)的抑制腫瘤細(xì)胞系生長的作用，混合溶劑提取的南極磷蝦油脂對HL60、U937的IC50值分別為0.137mg/mL和0.199mg/mL。利用硅膠柱分離南極磷蝦油脂，結(jié)果發(fā)現(xiàn)一種極性介于游離脂肪酸和磷脂之間的Ⅱ號組分是賦予南極磷蝦油脂抗腫瘤活性的關(guān)鍵組分。
　　最后采用蛋白酶解法對多相鹽析后分離的固相進(jìn)行酶解。經(jīng)過單因素