2023年全國(guó)碩士研究生考試考研英語(yǔ)一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁(yè)
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1、目前,人工合成抗氧化劑被廣泛應(yīng)用于食品中抑制脂肪氧化,并取得了很好的效果,但是,出于對(duì)食品安全性的考慮,其應(yīng)用已受到限制,因此,研究開(kāi)發(fā)植物來(lái)源的天然抗氧化劑以取代合成抗氧化劑具有十分重要的意義。黑加侖富含多種生物活性成分,如維生素、多酚、酚酸等,是天然抗氧化劑的良好來(lái)源,不僅能夠做為抗氧化劑應(yīng)用在食品中,還具有有益人體健康的潛在功效,如抗癌、清除體內(nèi)自由基等。本課題以黑加侖凍果為原料,制備了具有強(qiáng)抗氧化活性和高花色苷含量的黑加侖提取物

2、,研究了提取物的抗氧化活性和穩(wěn)定性,以及在肉糜和色拉醬中的抗氧化效果,同時(shí),還研究了黑加侖提取物誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡,以及對(duì)人胚肺成纖維細(xì)胞免于受到H2O2損傷的保護(hù)作用。研究?jī)?nèi)容和研究結(jié)果如下:
   1、通過(guò)單因素試驗(yàn)確定黑加侖提取物的最佳制備條件。選擇乙醇溶液為提取溶劑,最終確定乙醇體積分?jǐn)?shù)為40%,提取時(shí)間2h,該條件下所得的提取物具有最佳的花色苷含量和抗氧化能力。將提取物于40℃旋轉(zhuǎn)蒸發(fā),所得濃縮液中多酚含量為12.2 m

3、g/mL,花色苷含量為4.1 mg/mL,該濃縮液用于后續(xù)試驗(yàn)。
   2、對(duì)黑加侖提取物的抗氧化活性進(jìn)行評(píng)價(jià),將25 mg/mL提取物與0.01% BHA和0.01%抗壞血酸的抗氧化能力分別進(jìn)行對(duì)比,黑加侖提取物的還原能力、2,2-二苯基-1-間三硝基苯基聯(lián)肼(DPPH)自由基、2,2'-氨基-二(3-乙基-苯并噻唑啉磺酸-6)銨鹽(ABTS)自由基和超氧自由基清除率均顯著高于抗壞血酸和BHA(P<0.05),但是,提取物的羥

4、基自由基清除率顯著低于抗壞血酸和BHA(P<0.05)。
   2、應(yīng)用液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀分析黑加侖提物中的多酚成分。提取物中主要有6種花色苷,分別為矢車(chē)菊素-3-O-蕓香糖苷、飛燕草素-3-O-蕓香糖苷、矢車(chē)菊素-3-O-葡萄糖苷、飛燕草素-3-O-葡萄糖苷、芍藥花青素-3-O-蕓香糖苷、天竺葵色素-3-O-蕓香糖苷,占總峰面積的52.1%,其中前四種花色苷占總花色苷的88.8%;其他多酚物質(zhì)分別為楊梅酮蕓香糖苷、楊梅酮葡萄

5、糖苷、槲皮素-3-O-蕓香糖苷、槲皮素葡萄糖苷、山奈黃素蕓香糖苷、異鼠李素蕓香糖苷和三柰酚葡萄糖苷,占總峰面積的47.9%。
   3、對(duì)黑加侖提取物的抗氧化穩(wěn)定性以及提取物中花色苷的穩(wěn)定性進(jìn)行研究:
   (1)將花色苷含量為100 mg/mL的黑加侖提取物在60℃、80℃和100℃加熱1~5h,測(cè)定提取物的花色苷含量和抗氧化活性,結(jié)果表明,加熱導(dǎo)致提取物中的花色苷含量降低,其降解符合一級(jí)動(dòng)力學(xué)反應(yīng),隨著溫度的增加,反

6、應(yīng)速率常數(shù)k增加,半衰期t1/2降低,反應(yīng)活化能為71.97 KJ/mol。隨著加熱溫度的升高和加熱時(shí)間的延長(zhǎng),花色苷的DPPH自由基、ABTS自由基、超氧自由基和羥基自由基清除率以及還原能力均有不同程度的下降,溫度越高、加熱時(shí)間越長(zhǎng),降低的越多。
   (2)將花色苷含量為100 mg/mL的黑加侖提取物在室外自然光、室內(nèi)自然光和避光條件下放置至25 d,測(cè)定提取物中的花色苷含量和抗氧化活性,結(jié)果表明,光照導(dǎo)致提取物中的花色苷

7、含量逐漸降低,降低順序?yàn)椋菏彝庾匀还?室內(nèi)自然光>避光?;ㄉ盏慕到夥弦患?jí)動(dòng)力學(xué)反應(yīng),室外自然光放置時(shí),一級(jí)反應(yīng)速率常數(shù)k最高,半衰期t1/2最短,室內(nèi)自然光放置和避光放置的反應(yīng)速率常數(shù)均較自然光放置的低,半衰期也增加。光照方式對(duì)提取物清除DPPH自由基、ABTS自由基、超氧自由基、羥基自由基的能力和還原能力的降低順序?yàn)椋菏彝庾匀还?室內(nèi)自然光>避光,且放置時(shí)間越長(zhǎng),抗氧化能力降低的越多。
   (3)將pH3~7的黑加侖提取

8、物于室內(nèi)自然光條件下放置至15 d,測(cè)定花色苷含量、DPPH自由基、ABTS自由基清除率和還原能力。結(jié)果表明,不同pH提取物呈現(xiàn)不同的顏色,pH增大,最大吸收波長(zhǎng)發(fā)生紅移,pH低時(shí),抗氧化能力比較穩(wěn)定,在放置過(guò)程中降低的幅度較小,pH高時(shí),抗氧化能力降低的較快。
   4、將添加量為5 g/kg、10 g/kg和20 g/kg的黑加侖提取物添加到肉糜中,4℃冷藏9d,測(cè)定肉糜的TBARS值、羰基含量、巰基含量和色差值。結(jié)果表明,

9、黑加侖提取物能夠降低肉糜的TBARS值,抑制脂肪氧化,且添加量越大,抑制效果越強(qiáng);提取物能夠降低羰基的含量和減少巰基的損失,抑制了蛋白的氧化,但抑制效果不如抑制脂肪氧化的效果明顯;此外,黑加侖提取物能增加肉糜的紅度值,保持肉糜鮮紅的色澤。
   5、將添加量為2.5、5和10 g/kg的黑加侖提取物添加到色拉醬中,25℃貯藏6周,測(cè)定色拉醬的POV值、TBARS值、粘度和紅度值。結(jié)果表明,黑加侖提取物能降低色拉醬的POV值和TB

10、ARS值,抑制脂肪氧化,同時(shí),也能降低色拉醬的粘度,提高紅度值。對(duì)多酚和花色苷在液相中分布的測(cè)定結(jié)果表明,大部分多酚和花色苷分布在液相中,在液相發(fā)揮其抗氧化作用。
   6、將2.5、5、10、15和20 mg/mL的黑加侖提取物作用于胃癌SGC-7901細(xì)胞12、24和48 h,提取物能夠以劑量依賴(lài)和時(shí)間依賴(lài)的方式抑制細(xì)胞增殖,12、24和48h時(shí)的IC50分別為12.7,10.2和9.0 mg/mL;通過(guò)倒置顯微鏡和熒光顯微

11、鏡觀察到,經(jīng)黑加侖提取物作用以后,細(xì)胞出現(xiàn)典型的凋亡特征,細(xì)胞收縮,胞質(zhì)濃縮,形成胞漿絲,細(xì)胞核固縮濃染,熒光強(qiáng)度增加,部分細(xì)胞顏色發(fā)白,呈碎塊狀致密濃染;流式細(xì)胞檢測(cè)結(jié)果進(jìn)一步說(shuō)明了黑加侖提取物能夠誘導(dǎo)SGC-7901細(xì)胞發(fā)生凋亡。
   7、黑加侖提取物對(duì)人胚肺成纖維細(xì)胞MRC-5具有保護(hù)作用,使其較少受到H2O2的損傷作用。黑加侖提取物能夠提高細(xì)胞的存活率,熒光顯微鏡觀察和流式細(xì)胞檢測(cè)結(jié)果說(shuō)明發(fā)生凋亡的細(xì)胞數(shù)量減少,并且,

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