茶樹花提取物的抗氧化活性及其對HepG2細(xì)胞的抗增殖活性.pdf

1、科技的進(jìn)步促進(jìn)了人類生活品質(zhì)的提高和社會的發(fā)展，但同時也造成了空氣污染、農(nóng)藥殘留、重金屬、輻射等副作用，給人們帶來了額外的機體過氧化負(fù)擔(dān)，激發(fā)活性氧自由基的生成，而活性氧自由基是一種因輻射或者機體自然代謝的副產(chǎn)物的影響而產(chǎn)生的誘變劑，包括O2、H2O2、·OH等，一旦在體內(nèi)長期積累，就會對DNA、蛋白質(zhì)和脂質(zhì)造成氧化性損傷，這些損傷是機體衰老和老年退行性疾病，如心腦血管疾病、免疫系統(tǒng)衰退、腦功能障礙等的主要原因。尤其是DNA的氧化損傷會

2、導(dǎo)致DNA畸變和原癌基因、腫瘤抑制基因突變，誘變出細(xì)胞的無限增殖能力，導(dǎo)致癌癥和腫瘤。近年來，在“藥食同源”這一新概念的倡導(dǎo)下，通過攝入天然植物功能食品來清除體內(nèi)多余的自由基，防治慢性疾病，延緩衰老已成為重要的保健手段。關(guān)于各種功能食品的研究不斷深入，不少天然植物，如茶葉，已經(jīng)被證實具有抗氧化、抗增殖、抗輻射等保健效果和對疾病的防治能力。茶樹花與茶葉成分類似，蘊含有大量的活性物質(zhì)，且產(chǎn)量巨大，理論上也有強力的抗氧化和抗增殖等效果，但長期

3、被視為茶葉外無用的副產(chǎn)品，其相關(guān)的功能研究也很少，造成了資源的浪費。因此，本研究著力于探明不同茶樹花品種、不同部位（全花、花瓣和花粉）的抗氧化、抗增殖能力以及他們之間的相關(guān)性。主要研究內(nèi)容和成果如下：
　　1．采用ORAC法、PSC法和CAA法對六個茶樹花全花提取物進(jìn)行抗氧化活性評價，結(jié)果表明：四川群體品種的ORAC、PSC、CAA值（未經(jīng)PBS清洗）均是最高，分別為3504.99±281.65μmol Trolox/g、1442

4、.73±75.01μmol VC/g和24.01±0.20μmol Quercetin/g；四川群體品種的CAA值（經(jīng)PBS清洗）與最高的福選九號無顯著差異，為10.53±0.42μmol Quercetin/g。因此，在所測六個品種中，四川群體品種具有最高的體外抗氧化活性和細(xì)胞抗氧化活性，是抗氧化能力最強的茶樹花品種。
　　2．采用ORAC法、PSC法和CAA法對六個茶樹花花瓣和花粉提取物進(jìn)行抗氧化活性評價，結(jié)果表明：四川群體品

5、種的花瓣和花粉有最高（或與最高的值無顯著差異）的 ORAC值（2947.48±165.99μmol Trolox/g和4575.16±170.74μmol Trolox/g）、PSC值（632.09±73.91μmol VC/g和1060.50±82.28μmol VC/g）、經(jīng)PBS清洗的CAA值（11.19±0.37μmol Quercetin/g和11.73±0.56μmol Quercetin/g）和未經(jīng)PBS清洗的CAA值（2

6、4.29±1.39μmol Quercetin/g和25.71±0.26μmol/g）。因此，在所測六個品種中，四川群體品種茶樹花花瓣和花粉具有綜合最高的體外抗氧化活性和細(xì)胞抗氧化活性，是抗氧化能力最強的品種。
　　3．將各全花、花瓣和花粉提取物的ORAC、PSC和CAA值與其對應(yīng)的總酚、咖啡堿、兒茶素等含量進(jìn)行相關(guān)性分析。結(jié)果表明：總酚含量、總兒茶素含量與ORAC、PSC和CAA值之間存在顯著或極顯著正相關(guān)；兒茶素單體中的EGC

7、G與各抗氧化活性值均有極顯著（P＜0.01）的相關(guān)性，其相關(guān)性較其他單體更強且穩(wěn)定。EGCG的含量與抗氧化活性有最顯著的相關(guān)性，可以較好的預(yù)測茶樹花樣品的抗氧化能力。
　　4．用六個品種茶樹花的全花、花瓣和花粉提取物對HepG2人肝癌細(xì)胞進(jìn)行抗增殖活性的檢測，并計算其增殖率和半數(shù)效應(yīng)濃度（EC50）。結(jié)果顯示：在所有樣品中，福選九號的全花和花粉有最低的 EC50值，分別為55.28±17.98和63.95±9.77 mg/L，說明

8、福選九號的全花和花粉有最強的抗增殖活性；四川群體品種的花瓣有最低的EC50值，為72.56±26.22 mg/L，所以四川群體品種的花瓣有最強的抗增殖活性。
　　5．將全花、花瓣和花粉提取物的各個EC50值與其對應(yīng)的ORAC、PSC、CAA值進(jìn)行相關(guān)性分析。結(jié)果顯示：樣品EC50與ORAC值（R2＝—0.389，P＜0.01）之間有極顯著的負(fù)相關(guān)關(guān)系，與PSC值（R2＝—0.179，P＞0.05）無顯著相關(guān)性；與兩個CAA值也均無

9、顯著（P＞0.05）相關(guān)性，因此，ORAC抗氧化活性值與抗增殖活性有顯著的正相關(guān)。此外，ORAC、PSC、CAA值之間均存在極顯著（P＜0.01）相關(guān)性，表明本文所選擇的體外或間接體內(nèi)抗氧化活性評價方法對樣品的評價結(jié)果是一致的。
　　6．對茶樹花的全花、花瓣和花粉提取物的生化成分及抗氧化、抗增殖活性整體進(jìn)行顯著性分析，結(jié)果顯示：花粉和花瓣樣品的總酚含量顯著高于（P＜0.05）全花樣品，花粉和花瓣樣品之間無顯著差異；花粉樣品的總兒茶

10、素與酯型兒茶素含量最高（P＜0.05）；花粉和花瓣樣品的ORAC值顯著高于（P＜0.05）全花樣品，花粉和花瓣樣品之間無顯著差異（P＞0.05）；花粉樣品的PSC值最高（P＜0.05）， EC50值最低（P＜0.05）；全花、花瓣和花粉的CAA值均無顯著差異（P＞0.05）。綜上，在六個重慶地區(qū)常見的茶樹花品種中，花粉提取物的酚類物質(zhì)含量高，體外（in vitro）抗氧化能力強，抗增殖能力最強，花瓣次之；CAA抗氧化評價方法所得的值與部