曲古抑菌素A與羅格列酮聯(lián)合應(yīng)用對胃癌細(xì)胞增殖與侵襲能力的抑制作用.pdf

1、目的：研究組蛋白去乙?；敢种苿┣乓志谹（TSA）與過氧化物酶體增殖物激活受體丫配體羅格列酮（ROZ）聯(lián)合應(yīng)用對胃癌細(xì)胞株SGC-7901增殖的影響，并探討其可能的作用機(jī)制。 方法：首先用不同濃度的TSA和ROZ分別作用于細(xì)胞，用四甲基偶氮唑藍(lán)（MTT）法檢測兩種藥物各自對細(xì)胞增殖的抑制作用，以篩選出合適的聯(lián)合濃度。將SGC-7901細(xì)胞隨機(jī)分組，即對照組、TSA組、ROZ組和TSA與ROZ聯(lián)合組。對各組細(xì)胞處理48h后，應(yīng)

2、用MTT法檢測細(xì)胞抑制率，并應(yīng)用流式細(xì)胞儀檢測細(xì)胞周期情況，RT-PCR檢測PPARy和cyclin D1 mRNA的表達(dá)。 結(jié)果：MTT顯示，對細(xì)胞抑制作用不顯著的低劑量TSA和ROZ聯(lián)用時(shí)能較大幅度增強(qiáng)ROZ的抑制效果，聯(lián)合組G0/G1期細(xì)胞比例較單用TSA或ROZ組明顯增加，且cyclin D1 mRNA表達(dá)明顯減少；TSA作用細(xì)胞后PPARγmRNA表達(dá)較對照組明顯增多，而ROZ單獨(dú)作用后PPARγmRNA表達(dá)無改變。

3、 結(jié)論：組蛋白去乙酰化酶通過一系列分子機(jī)制限制過氧化物酶體增殖物激活受體γ的激活，而聯(lián)合應(yīng)用TSA和ROZ可協(xié)同抑制胃癌細(xì)胞的增殖。 目的：觀察組蛋白去乙?；福╤istone deacetylase，HDAC）在過氧化物酶體增殖物激活受體-γ（PPARγ）途徑影響胃癌細(xì)胞株SGC-7901侵襲能力中的作用及機(jī)制。 方法：用不同濃度的HDAC抑制劑曲古抑菌素A（TSA）和PPARγ配體羅格列酮（ROZ）分別作用于細(xì)

4、胞，用四甲基偶氮唑藍(lán)（MTT）法檢測兩種藥物對細(xì)胞生長的抑制作用，以篩選出合適的聯(lián)合濃度。將SGC-7901細(xì)胞隨機(jī)分組，即對照組、TSA組、ROZ組和TSA與ROZ聯(lián)合組。用MTT法檢測細(xì)胞增殖抑制率，應(yīng)用Transwell小室法檢測各組胃癌細(xì)胞侵襲能力，應(yīng)用RT-PCR檢測各組細(xì)胞PPARγ、MMP2 mRNA表達(dá)情況，Western blot檢測MMP2蛋白的表達(dá)。 結(jié)果：5μmol/L ROZ和40 nmol/L TSA

5、為無明顯細(xì)胞毒性作用的最高濃度，低于此濃度的ROZ及TSA可減弱SGC-7901細(xì)胞的侵襲能力（P<0.01）。5μmol/L ROZ與20 nmol/L TSA聯(lián)合作用對SGC-7901細(xì)胞的侵襲抑制呈協(xié)同作用（q=1.41>1.15）。ROZ可以下調(diào)SGC-7901細(xì)胞MMP-2 mRNA和蛋白的表達(dá)（P<0.01），TSA與ROZ聯(lián)合處理對細(xì)胞MMP2表達(dá)較單用ROZ組下調(diào)明顯（P<0.01）。RT-PCR結(jié)果顯示TSA作用SGC