siRNA沉默泛素特異性肽酶22基因對胃癌細胞增殖的抑制作用.pdf

1、本文主要從以下幾個部分展開論述：
　　第一部分:泛素特異性肽酶22在胃癌中的表達及其臨床意義
　　目的:研究胃癌組織中泛素特異性肽酶22(USP22)的表達及意義。
　　方法:使用免疫組化 SABC法檢測146例標本(100例胃癌、46例癌旁正常組織)中USP22的表達情況,并將表達情況與病例的臨床病例資料相聯系。
　　結果:胃癌組織中USP22的陽性率為80％,陽性表達率明顯高于正常組織。胃癌的分期與陽性表達呈

2、正相關,胃癌的分化程度與陽性表達呈負相關。
　　結論:USP22可能是胃癌新的分子標志物。
　　第二部分:SiRNA沉默 USP22基因對胃癌細胞增殖的抑制作用
　　目的:研究胃癌細胞中沉默泛素特異性肽酶22(ubiquitin specific peptidase22, USP22)的表達后其增殖的影響。
　　方法:設計三條 siRNA及陰性 siRNA針對 USP22基因,采用脂質體 Lipofectamin

3、e2000轉染胃癌 AGS細胞,Realtime-PCR檢測轉染后 AGS細胞中USP22 mRNA表達水平;Western-blot檢測轉染后 AGS細胞中USP22蛋白質表達水平的變化情況;采用流式細胞術檢測細胞周期分布變化;采用CCK8法檢測細胞增殖率及抑制率。
　　結果:在轉染48小時后,三段干擾的片段都能分別在 mRNA和蛋白水平上有效的抑制USP22的表達,其中轉染 USP22 siRNA3后效果最明顯,USP22的m