基于二維凝膠電泳與質(zhì)譜聯(lián)用的枯草芽孢桿菌蛋白質(zhì)組分析.pdf

1、蛋白質(zhì)組學(xué)是研究基因組表達(dá)的所有蛋白質(zhì)的一門學(xué)科，是后基因組時(shí)代組學(xué)研究中的重要組成部分，在不同交叉領(lǐng)域均取得了非常重要的成果。枯草芽孢桿菌作為重要的革蘭氏陽性菌模式生物，不僅在基礎(chǔ)生物學(xué)領(lǐng)域有重要的應(yīng)用，同時(shí)也是非常重要的工業(yè)微生物。因此，本文嘗試?yán)玫鞍踪|(zhì)組學(xué)研究方法對基因工程改造后的枯草芽孢桿菌和原始菌株進(jìn)行差異研究。
　　 本實(shí)驗(yàn)使用經(jīng)典的蛋白質(zhì)組學(xué)研究方法(二維凝膠電泳)對兩株菌進(jìn)行全蛋白質(zhì)組分析。具體使用的實(shí)驗(yàn)技術(shù)有

2、：樣品制備技術(shù)；二維凝膠電泳分離技術(shù)；凝膠染色技術(shù)；圖像分析技術(shù)；質(zhì)譜鑒定技術(shù)和生物信息學(xué)相關(guān)技術(shù)。
　　 實(shí)驗(yàn)得出了兩株細(xì)菌的蛋白質(zhì)表達(dá)譜，并且著重對產(chǎn)核黃素的相關(guān)代謝途徑進(jìn)行差異蛋白質(zhì)組分析，得到了部分重要代謝途徑相關(guān)信息，用于菌種下一步改造。具體結(jié)果為：
　　 (1)使用凝膠電泳分離方法共鑒定出840個(gè)蛋白質(zhì)點(diǎn)，分別由542個(gè)基因編碼。其中83個(gè)蛋白質(zhì)出現(xiàn)兩倍以上下調(diào)，75個(gè)蛋白質(zhì)出現(xiàn)兩倍以上上調(diào)，其余蛋白質(zhì)變化均