葉酸介導(dǎo)西紫杉醇牛血清白蛋白腫瘤靶向納米粒制備、表征及體外釋放性能評(píng)價(jià).pdf

1、多西紫杉醇( Docetaxel)是建立在紫杉醇基礎(chǔ)上的第二代紫杉烷類抗癌藥的代表，在抗癌試驗(yàn)中多西紫杉醇的活性比紫杉醇的活性要高。這種藥物不僅僅只針對(duì)卵巢癌、非小細(xì)胞肺癌和乳腺癌具有良好的療效，而且對(duì)前列腺癌、胰癌、和多種軟組織腫瘤也都具有良好的療效，是目前臨床化療藥物的一線用藥。但是目前多西紫杉醇制劑還存在一些缺點(diǎn)：非水溶性、無(wú)靶向性、致敏性和毒副作用。
　　 本文針對(duì)多西紫杉醇制劑水溶性差和無(wú)靶向性缺點(diǎn)進(jìn)行靶向水溶性制劑的

2、研究。嘗試了常規(guī)反溶劑法、機(jī)械粉碎方法、超聲乳化法和超臨界流體反溶劑法制備多西紫杉醇納米藥物，但由于其各自的局限性無(wú)法制備出滿意的納米藥物。最終選擇去溶劑化-化學(xué)交聯(lián)法制備DT-BSA-NPs來(lái)解決多西紫杉醇水溶性這一難題。用葉酸偶聯(lián)DT-BSA-NPs解決其靶向性問(wèn)題。
　　 通過(guò)對(duì)制備過(guò)程中的重要影響因素進(jìn)行考察，選取6個(gè)因素的可行范圍，并利用Design-expert軟件進(jìn)行析因數(shù)據(jù)優(yōu)化，對(duì)實(shí)驗(yàn)中的白蛋白濃度、多西紫杉醇濃

3、度、醇水比例、交聯(lián)比、滴速等重要條件進(jìn)行分析，最終得優(yōu)化條件：BSA濃度為35.1me/mL，DT濃度為3.96mg/mL，乙醇和水的比例為2.99，乙醇的滴加速度為0.5mL/min，攪拌時(shí)間為36h，戊二醛和白蛋白交聯(lián)比例為1。此條件預(yù)計(jì)結(jié)果為：粒徑181.65 nm，最大包封率為26.3％，最大載藥量12.43%。
　　 經(jīng)過(guò)認(rèn)證試驗(yàn)，用激光粒度儀測(cè)量了DT-BSA-NPs的粒徑和電位，得出DT-BSA-NPs的粒徑188

4、nm、電位-39.76mV;用紫外分光光度計(jì)測(cè)出包封率為30.63%、載藥量13.92%，確定得到的產(chǎn)品符合要求。
　　 之后用葉酸活性酯偶聯(lián)制備成功的DT-BSA-NPs得到FA-DT-BSA-NPs，使其具有靶向性。通過(guò)對(duì)FA-DT-BSA-NPs進(jìn)行紫外分光光度計(jì)檢測(cè)，得到白蛋白摩爾數(shù)比偶聯(lián)葉酸摩爾數(shù)為1：2.56。對(duì)FA-DT-BSA-NPs抽三個(gè)樣品進(jìn)行檢驗(yàn)其粒徑在190nm左右，電位-30mV左右，綜合掃描電鏡的超微

5、圖片，得知FA-DT-BSA-NPs的平均粒徑要比DT-BSA-NPs略大，以無(wú)序的晶體狀多西紫杉醇，被包裹后形成球狀，且通過(guò)X-ray圖譜發(fā)現(xiàn)FA-DT-BSA-NPs和多西紫杉醇峰值明顯不同，說(shuō)明多西紫杉醇晶型有改變。在紅外光譜下可以清晰看到FA-DT-BSA-NPs在1652cm-1處有明顯的特征峰，暗示有N-O化學(xué)鍵生成，不是單純的物理混合。經(jīng)過(guò)對(duì)干粉FA-DT-BSA-NPs復(fù)溶12小時(shí)的觀察與檢測(cè)。其各項(xiàng)數(shù)據(jù)未發(fā)生較大變化，

6、基本一樣。證明經(jīng)復(fù)溶后的FA-DT-BSA-NPs在12小時(shí)內(nèi)保持了良好的穩(wěn)定性。經(jīng)檢測(cè)分散均勻的納米微球，載藥量和包封率無(wú)明顯變化。用粒徑201nm，包封率32.9%，載藥量為14.8%的藥物做體外釋放實(shí)驗(yàn)。在最初的24 h內(nèi)藥物傳遞速度比較快，之后緩慢釋放至96h。證明其具有緩釋性質(zhì)。
　　 通過(guò)以上實(shí)驗(yàn)和分析，證實(shí)本實(shí)驗(yàn)得到的最終FA-DT-BSA-NPs產(chǎn)品粒徑達(dá)到過(guò)0.22uM膜滅菌要求，并且分布均勻，形態(tài)規(guī)整。成功的