糧食水溶性蛋白結(jié)合膽酸鹽能力及膽酸鹽免疫檢測方法的研究.pdf

1、提取稻谷、小麥、大豆、玉米、馬鈴薯和甘薯等6種主要糧食水溶性蛋白,分析它們的組成特點及其在體外與膽酸鹽吸附的能力。大豆水溶性蛋白含量最高,小麥次之,馬鈴薯最低;稻谷、大豆和小麥的水溶性蛋白種類多,而甘薯的種類最少。各樣品的水溶性蛋白對膽酸鈉、脫氧膽酸鈉和?；悄懰徕c都具有結(jié)合作用。在相同質(zhì)量蛋白質(zhì)的情況下,小麥水溶性蛋白結(jié)合膽酸鹽的能力最強,而馬鈴薯、甘薯的水溶性蛋白結(jié)合膽酸鹽的能力則顯著性低于其他樣品。這些糧食水溶性蛋白結(jié)合膽酸鹽能力的

2、差異主要與蛋白種類數(shù)和組成有關(guān),低相對分子質(zhì)量的水溶性蛋白對膽酸鹽的結(jié)合能力可能比高相對分子質(zhì)量的水溶性蛋白更強。
　　食物中的可溶性淀粉和維生素 C對糧食水溶性蛋白結(jié)合膽酸鹽的能力有一定的影響,同等質(zhì)量下,除小麥水溶性蛋白以外,其余五種糧食水溶性蛋白與可溶性淀粉混合后,吸附膽酸鹽的能力均增強;六種糧食水溶性蛋白與維生素 C混合后吸附膽酸鹽的能力均得到提高,但均低于維生素 C對膽酸鹽的結(jié)合量,除小麥水溶性蛋白以外。其中可溶性淀粉和

3、維生素 C對甘薯水溶性蛋白的影響最為顯著?？扇苄缘矸凼垢适硭苄缘鞍捉Y(jié)合膽酸鹽的能力提高3.73倍;同時維生素C使甘薯水溶性蛋白結(jié)合膽酸鹽的能力提高6.3倍?？扇苄缘矸叟c小麥蛋白混合后使小麥結(jié)合膽酸鹽的能力降低45.9％。
　　使用碳化二亞胺法成功制備?；悄懰徕c完全抗原牛磺膽酸鈉-牛血清白蛋白(STC-BSA)和包被抗原?；悄懰徕c-卵清蛋白(STC-OVA),用紫外分光光度法鑒定合成結(jié)果。免疫Balb/c小鼠,獲得抗STC-BSA

4、的多克隆抗體血清,效價為6.4×10<'4>。初步建立了間接競爭ELISA測定STC的標準曲線,線性方程式為y=-22.8x+112.3,R2=0.9888。靈敏度約為0.5μg/L,檢測限約為9.33μg/L,工作范圍為9.33-30200μg/L。以250μg/mL-3000μg/mL濃度添加時,脫脂牛奶的加標實驗回收率為76.2%～108.5%之間,變異系數(shù)為1.9%～3.7%,為檢測血清以及食品中?；悄懰徕c的含量提供了一種微量、