大豆疫霉菌蘇氨酰tRNA合成酶的初步研究及其抑制劑的篩選.pdf

1、大豆疫霉病也叫大豆疫霉根腐病，是一種由大豆疫霉菌引起的、在世界范圍內(nèi)分布廣泛且危害性極其嚴(yán)重的土傳性病害。目前仍然是影響我國(guó)大豆產(chǎn)量的重要病害。本實(shí)驗(yàn)室在試驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)由鏈霉菌neau-D50產(chǎn)生的次級(jí)代謝產(chǎn)物borrelidin能夠有效抑制大豆疫霉菌的生長(zhǎng)，在此基礎(chǔ)上，本實(shí)驗(yàn)進(jìn)一步研究分析，確定了大豆疫霉菌的蘇氨酰tRNA合成酶(ThrRS)是borrelidin的重要靶標(biāo)。
　　 本文致力于找到同樣以ThrRS為靶標(biāo)，但與bor

2、relidin相比用藥劑量更小，結(jié)合效率更高的藥物，并應(yīng)用于實(shí)際，開發(fā)出對(duì)大豆疫霉菌更有效、更具實(shí)際應(yīng)用價(jià)值的藥物。主要研究結(jié)果如下：⑴采用CA培養(yǎng)基(胡蘿卜培養(yǎng)基)，測(cè)得borrelidin對(duì)大豆疫霉菌的半抑制濃度(EC50)為0.0056μg/mL，并測(cè)得在borrelidin濃度為0.05μg/mL時(shí)能夠完全抑制菌體的生長(zhǎng)。與本實(shí)驗(yàn)室測(cè)得的馬鈴薯晚疫病菌以及E.coli DH5α的EC50值相比大豆疫霉菌對(duì)borrelidin是敏

3、感性菌株，表明borrelidin對(duì)大豆疫霉菌的生長(zhǎng)有很強(qiáng)的抑制作用。⑵將蘇氨酸加入含有一定濃度borrelidin的CA培養(yǎng)基中，測(cè)得蘇氨酸能夠?qū)orrelidin抑制下大豆疫霉菌的生長(zhǎng)率從32.72％恢復(fù)到67.19％，根據(jù)該實(shí)驗(yàn)結(jié)果并參考前人研究，能夠推測(cè)出大豆疫霉菌的ThrRS是borrelidin的重要靶標(biāo)。⑶根據(jù)已知的大豆疫霉菌的ThrRS序列設(shè)計(jì)引物，克隆出基因全序列，與已知基因進(jìn)行比對(duì)，序列一致。由此確定了大豆疫霉菌T