新型酪氨酸酶抑制劑篩選及其活性測(cè)試.pdf

1、酪氨酸酶，又稱多酚氧化酶，是結(jié)構(gòu)復(fù)雜的多亞基的含銅氧化還原酶，廣泛存在于微生物和動(dòng)植物中，是昆蟲(chóng)表皮鞣化、果蔬褐變等現(xiàn)象的關(guān)鍵酶。酪氨酸酶是果蔬保鮮的中心話題，抑制其活性來(lái)延長(zhǎng)果蔬保鮮期成為了廣泛研究的課題，而酪氨酸酶抑制劑是其中一種主要的抑制方式。酪氨酸酶抑制劑主要有三種來(lái)源，天然植物來(lái)源、商品來(lái)源及有機(jī)合成，其抑制機(jī)理可分為不可逆抑制和可逆抑制兩種，而可逆抑制又可分為競(jìng)爭(zhēng)性抑制、非競(jìng)爭(zhēng)性抑制、混合型抑制。
　　 46種有機(jī)合

2、成的化合物中有24個(gè)有酪氨酸酶抑制效果，其中抑制率最低的是3.05％，抑制率最高的是99.03％。具有抑制能力的化合物中有7個(gè)100μmol/L抑制率高于50％，其半抑制濃度(IC50)分別是樣品4 IC50為20.4μmol/L、樣品22 IC50為62.46μmol/L、樣品26 IC50為1.76μmol/L、樣品30 IC50為57.73μmol/L、樣品34 IC50為89.23μmol/L、樣品42為1.1μmol/L和樣品

3、44 IC50為20.85μmol/L。通過(guò)酶動(dòng)力學(xué)試驗(yàn)測(cè)定，樣品26為非競(jìng)爭(zhēng)性可逆抑制劑，樣品42為混合競(jìng)爭(zhēng)性可逆抑制劑。
　　 急性毒性試驗(yàn)結(jié)果表明3-苯基-4-氨基-5-硫酮-1，2，4-三唑(APTT)和2-苯并噁唑肼(HBO)的半致死率LD50＞240 mg/Kg，屬于低毒酪氨酸酶抑制劑。
　　 鮮切果蔬中APTT對(duì)酪氨酸酶的抑制效果研究，經(jīng)過(guò)單因素和正交試驗(yàn)經(jīng)確定最佳的濃度、作用時(shí)間和溫度的最優(yōu)條件APTT對(duì)

4、紅富士蘋(píng)果中酪氨酸酶抑制作用的最優(yōu)工藝是APTT濃度為32μmol/L、溫度為20℃、作用時(shí)間為2075 s；APTT對(duì)香蕉中酪氨酸酶抑制的最優(yōu)工藝是APTT濃度為50μmol/L、溫度為15℃、作用時(shí)間為480 s；APTT對(duì)雪蓮果中酪氨酸酶抑制的最優(yōu)工藝是APTT濃度為32μmol/L、溫度為26℃、作用時(shí)間為454 s；APTT對(duì)牛蒡中酪氨酸酶抑制的最優(yōu)工藝是APTT濃度為500μmol/L、溫度為20℃、作用時(shí)間為480 s；A