奶制品中鄰苯二甲酸酯增塑劑的檢測方法研究.pdf

1、鄰苯二甲酸酯（phthalicacidesters，PAEs）在塑料工業(yè)中常用作增塑劑和軟化劑，用來增大塑料的可塑性和韌性。目前，保存奶制品的有效方法是進(jìn)行各種包裝處理，如塑料包裝等。但包裝材料直接與奶制品接觸，PAEs可遷移到奶制品中成為污染源；另外，在使用PVC軟管進(jìn)行機械采奶和加工過程中，也存在PAEs對奶制品的污染問題。因此，奶制品在生產(chǎn)過程、加工過程或包裝環(huán)節(jié)都有可能受到PAEs的污染，引起奶制品的飲用安全問題。 PA

2、Es是一種內(nèi)分泌干擾（endocrinedisrupting，ED）物質(zhì)，含有雌激素活性成分，我國將這類物質(zhì)稱為“環(huán)境激素類污染物”，有些PAEs還具有“三致”作用。歐盟指令2007/19/EC中規(guī)定6種PAEs最大殘留限量值（MRL）為：鄰苯二甲酸丁芐酯（BBP）30mg/kg、鄰苯二甲酸二丁酯（DBP）0.3mg/kg、[鄰苯二甲酸二（2-乙基已基）酯]（DEHP）1.5mg/kg，鄰苯二甲酸二正辛酯（DNOP）、鄰苯二甲酸二異壬酯

3、（DINP）和鄰苯二甲酸二異癸酯（DIDP）9mg/kg。 關(guān)于奶制品中PAEs的分析方法在國內(nèi)外還沒有現(xiàn)行的檢測標(biāo)準(zhǔn)發(fā)布，國外文獻(xiàn)報道不多，測定對象多為牛奶，其它奶制品如奶粉和乳酪均未見有報道。而國內(nèi)僅見一篇氣相色譜法測定進(jìn)口奶粉中PAEs的報道，測定對象僅涉及DBP和鄰苯二甲酸二乙酯（DEP）兩種物質(zhì)，說明奶制品中PAEs的污染問題和相關(guān)的檢測研究在國內(nèi)還沒有引起足夠的重視。因此，建立奶制品中PAEs殘留量的測定方法對于食品

4、安全及保護(hù)消費者的健康而言很有必要，同時為標(biāo)準(zhǔn)的建立及進(jìn)出口貿(mào)易提供技術(shù)保障。 本研究在參考國內(nèi)外文獻(xiàn)的基礎(chǔ)上，在樣品前處理和檢測方法方面加以改進(jìn)。試驗采用液液萃取和固相萃取的方法對提取液進(jìn)行樣品濃縮、凈化，滿足殘留檢測的要求。在分析方法選擇方面，采用液相色譜和液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜，前者為篩選法，后者為確證法。 本方法重點開展歐盟指令2007/19/EC中禁止與食品接觸的6種鄰苯二甲酸酯（BBP、DBP、DEHP、DNOP

5、、DINP和DIDP）的測定研究。樣品用甲醇、正己烷-甲基叔丁基醚（1：1，v/v）提取，冷凍去脂，液液萃取和固相萃取凈化后，用ODS柱（250×4.6mm，5μm）分離，以乙腈-水（99：1，v/v）為流動相，紫外波長為224nm，6種組分在25min內(nèi)完全出峰。BBP和DBP在0.05μg/mL-80μg/mL、DEHP和DNOP在0.1μg/mL-80μg/mL、DINP和DIDP在0.5μg/mL-80μg/mL的質(zhì)量濃度范圍內(nèi)

6、，峰面積與質(zhì)量濃度呈線性關(guān)系，相關(guān)系數(shù)（γ2）均大于0.998。方法檢測限：BBP0.15μg/g、DBP0.1μg/g、DEHP和DNOP0.2μg/g、DINP和DIDP0.6μg/g；6種PAEs在三種不同添加水平的平均回收率為81.1％-99.0％，準(zhǔn)確度高，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差為1.5％-7.3％，精密度較好。所建立的HPLC方法適用于牛奶樣品的測定，所需設(shè)備相對簡單，定量準(zhǔn)確可靠，且其最低檢測限（LOD）低于歐盟MRL值1到3個數(shù)量

7、級，滿足歐盟限量的檢測要求。 但對于其他奶制品（奶粉和乳酪）以及含酯量較高的黃油，用所建立的HPLC方法因受到檢測限的限制，并不能完全滿足添加回收試驗的指標(biāo)要求。因此，試驗考慮提高方法的靈敏度，采用質(zhì)譜檢測器，以滿足不同測定對象的分析要求。 為進(jìn)一步提高靈敏度，試驗采用HPLC-MS/MS方法，在樣品前處理基礎(chǔ)上，試驗做了部分改進(jìn)，在前處理過程中加入各自對應(yīng)的同位素（DINP和DIDP以DNOP-D4作為內(nèi)標(biāo)）作為內(nèi)標(biāo)，

8、將6種PAEs同時過固相萃取柱進(jìn)行凈化，實現(xiàn)了6種組分的同時檢測，大大縮短了分析時間。待測物用AtlantisC18柱（150×2.1mm，5μm）分離，以乙腈-水（95：5，v/v）含0.01％的CH3COONH4為流動相，質(zhì)譜部分的毛細(xì)管電壓為3000KV，離子化模式為ESI正離子，碰撞能量為8.2eV。和HPLC方法相比，HPLC-MS/MS方法可以降低雜質(zhì)的干擾，降低檢測限，更有利于基體復(fù)雜樣品的分析，同時也可進(jìn)行確證分析，防止

9、假陽性的出現(xiàn)。結(jié)果表明，6種PAEs在三種不同添加水平的平均加標(biāo)回收率為83.4％-100.5％，準(zhǔn)確度高，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差RSD均小于10％，精密度較好，滿足歐盟限量的檢測要求，且靈敏度比HPLC方法更高，更適合于痕量檢測要求。此方法滿足牛奶、奶粉、乳酪和黃油中6種PAEs的測定。 課題建立的HPLC方法適用于牛奶中PAEs的測定，滿足歐盟MRL值的限量要求，而建立的HPLC-MS/MS方法則適用于四類制品（牛奶、奶粉、乳酪和黃油