產朊假絲酵母富硒發(fā)酵的研究.pdf

1、本文擬探討利用產朊假絲酵母菌株發(fā)酵制備富硒酵母。首先對實驗室保藏的試驗酵母菌菌株進行篩選，獲得耐硒、富硒能力強的菌株為出發(fā)菌株，進行富硒搖瓶發(fā)酵與發(fā)酵罐發(fā)酵實驗，探討該菌富硒發(fā)酵的特性并對其發(fā)酵工藝進行優(yōu)化。 1.富硒酵母菌株的篩選利用平板法對試驗菌株進行耐硒性能實驗。在平板上分別接種酵母菌，培養(yǎng)基中的硒濃度分別采用 30、40、50、60、70、80、90、100 μg/mL，觀察菌落生長形態(tài)、菌落形態(tài)等特征，結果只有產朊假絲

2、酵母菌株Y-5、Y-6能在含硒濃度為90μg/mL，以上的培養(yǎng)基中生長，說明此兩株酵母菌具有較強的耐硒性能。將試驗酵母菌株在添加不同硒濃度培養(yǎng)基的三角瓶中接種發(fā)酵培養(yǎng)，篩選富硒能力強的菌株。分別在硒濃度為0、5、10、15、20、25μg/mL，的培養(yǎng)基中培養(yǎng)的結果表明，菌株Y-5的生物量、單位硒含量、發(fā)酵總硒含量在每一個硒濃度水平上都是最高的，表現(xiàn)出很強的富硒能力。因此確定為本實驗的富硒出發(fā)菌株。 2.產朊假絲酵母Y-5搖瓶富

3、硒發(fā)酵本實驗對菌株Y-5的富硒發(fā)酵培養(yǎng)基組成及發(fā)酵條件進行優(yōu)化。通過單因子實驗，確定了搖瓶發(fā)酵的最優(yōu)條件。培養(yǎng)基組成為：麥芽汁糖度10<'0>Brix，尿素濃度為1 g/L，培養(yǎng)基初始硒濃度為15μg/mL，初始pH值為5.5。發(fā)酵條件為：移種量5％，發(fā)酵溫度28℃，裝液量50 mL/250 mL三角瓶，發(fā)酵周期為48 h。在此優(yōu)化條件下所得到的富硒酵母的細胞生物量為5.12 g/L，單位硒含量為2268.34 μg/g，發(fā)酵總硒含量為

4、11613.90 μg/L。在單因子實驗基礎上進行的正交實驗結果分析表明，培養(yǎng)基中硒濃度是影響酵母富硒指標(生物量、單位硒含量、發(fā)酵總硒含量)的最主要因素。本實驗結果表明以培養(yǎng)基中的硒濃度15 μg/mL，為宜。 3.發(fā)酵罐富硒發(fā)酵通過對產朊假絲酵母菌株Y-5的搖瓶優(yōu)化，掌握了該菌富硒發(fā)酵的基本特性。并且在該發(fā)酵條件下獲得了高硒酵母(2000 μg/g以上)。為了進一步探討其在工業(yè)生產的可行性，在搖瓶實驗結果的基礎上進行了7 L