高富硒量螺旋藻的混養(yǎng)研究及硒的形態(tài)分析.pdf

1、　　硒(Selenium)是唯一受基因調(diào)控的人體必需微量元素,螺旋藻(Spirulina platensis)是富集和轉(zhuǎn)化硒的理想載體。本實(shí)驗(yàn)比較了不同加硒方法對(duì)螺旋藻富硒的影響,并在優(yōu)化的加硒條件下對(duì)富硒螺旋藻進(jìn)行混養(yǎng)研究；對(duì)藻體中的硒及藻代謝后排出藻細(xì)胞外的氣態(tài)烷基硒進(jìn)行形態(tài)分析；并對(duì)自養(yǎng)、異養(yǎng)和混養(yǎng)條件下螺旋藻超微結(jié)構(gòu)的差異進(jìn)行表征,取得了一些有意義的結(jié)果。
　　1.硒對(duì)螺旋藻具有刺激促進(jìn)與致毒抑制的雙重作用。對(duì)于一次性加硒

2、法,在適當(dāng)?shù)奈鴿舛?≤150mg/L)下,鈍頂螺旋藻能有效的富集、轉(zhuǎn)化培養(yǎng)基中的無機(jī)硒為有機(jī)硒,并可同時(shí)觀察到藻體中多種活性物質(zhì)如類葉黃素、類胡蘿卜素及葉綠素a、藻膽蛋白等含量的提高。但是,更高的硒濃度(≥200mg/L)脅迫處理在獲得較高的硒富集量的同時(shí),明顯的抑制藻的生長(zhǎng),導(dǎo)致螺旋藻生物量及多種活性物質(zhì)(包括光合色素及藻膽蛋白等)含量的降低。大部分硒的富集轉(zhuǎn)化都是在大約3天內(nèi)達(dá)到平衡,并且大部分(約90%)以有機(jī)硒的形式存在于藻體中

3、。
　　2.在螺旋藻生長(zhǎng)周期的第7、8、9三天分次加硒,既可提高富硒量又可降低高硒對(duì)螺旋藻的抑制作用。結(jié)果表明此加硒方法可提高其最終生物量(1.34g/L,對(duì)照組為1.18g/L),硒產(chǎn)量高達(dá)1743.06μg/L,且藻體中各種主要活性物質(zhì)均有不同程度的增加,證明這是一種理想的富硒處理方法。
　　3.建立了Dansyl柱前衍生化-高效液相色譜法及Waters AccQ·Tag氨基酸HPLC分析法用于分離測(cè)定18種通用氨基酸及

4、硒代蛋氨酸,效果滿意。
　　4.按優(yōu)化方法培養(yǎng)的富硒螺旋藻干粉中總硒含量為1.176mg/g,其中有機(jī)硒為1.105mg/g,有機(jī)化率為94%。Dansyl柱前衍生化-高效液相色譜法測(cè)定結(jié)果顯示：藻體中含硒氨基酸主要形態(tài)為Se-Met,含量為0.261mg/g,按硒計(jì)則為0.105mg/g,占有機(jī)硒的9.5%,說明藻體內(nèi)尚存在較多的其他形式的有機(jī)硒。
　　5.甲基化是硒在生物體中的重要代謝途徑。本實(shí)驗(yàn)采用吹掃捕集-GC-MS