茶渣中蛋白質(zhì)和多糖的綜合提取及其分離純化.pdf

1、I中文摘要隨著茶葉深加工領(lǐng)域的不斷拓展，大批茶飲料廠、茶多酚廠等茶葉深加工廠紛紛開(kāi)辦，由此產(chǎn)生了大量的茶渣。研究表明，在加工過(guò)程中我們利用的僅僅是茶葉中的水溶性成分，經(jīng)過(guò)提取的茶渣仍殘留1％2％的茶多酚，0.1％0.3％的咖啡堿，17％19％的粗蛋白，16％18％的粗纖維，氨基酸中賴氨酸和蛋氨酸的組成分別為1.5％2％和0.5％0.7％因此茶渣有較高的潛在利用價(jià)值。本研究以速溶茶加工過(guò)程中產(chǎn)生的茶渣為原料，利用纖維素酶、堿性蛋白酶等酶解

2、條件下提取、分離、純化蛋白質(zhì)、多糖等有效成分的工藝進(jìn)行了系統(tǒng)研究。茶渣原料的主要組成：水分3.57%，灰分5.83%、蛋白質(zhì)21.05%，粗纖維23.20%。在單因素實(shí)驗(yàn)的基礎(chǔ)上進(jìn)行響應(yīng)面法參數(shù)優(yōu)化，纖維素酶酶解結(jié)果為：溫度41℃、加酶量2%、pH值6.4、時(shí)間64min，最終可溶糖提取率為2.18%。同法確定了堿性蛋白酶的最佳酶解條件為：溫度60℃、加酶量2%、pH值8.7、時(shí)間90min，最終蛋白質(zhì)提取率為20.93%。依照最佳的纖

3、維素酶和堿性蛋白酶酶解條件，雙酶法提取茶渣蛋白質(zhì)的提取率為32.18%。利用等電點(diǎn)沉淀的方法沉淀蛋白質(zhì)，最終確定最佳沉淀等電點(diǎn)值為2。用活性炭對(duì)蛋白提取液進(jìn)行脫色，波長(zhǎng)420nm處進(jìn)行檢測(cè)，經(jīng)單因素實(shí)驗(yàn)與正交實(shí)驗(yàn)確定茶葉蛋白質(zhì)提取液的最佳脫色條件為：活性炭添加量3.5%，脫色溫度45℃，脫色時(shí)間60min。在此條件下，茶葉蛋白質(zhì)溶液的脫色率為88.80%，蛋白保留率為77.76%。利用氨基酸自動(dòng)分析儀對(duì)茶葉蛋白質(zhì)的氨基酸組成進(jìn)行分析，結(jié)

4、果發(fā)現(xiàn)：茶葉蛋白質(zhì)的氨基酸組成比較豐富，必需氨基酸檢出7中，其中天冬氨酸、谷氨酸、亮氨酸的比例分別達(dá)到了9.69%、10.75%、8.43%，賴氨酸、苯丙氨酸、蘇氨酸、異亮氨酸、纈氨酸等所占的比例較高。正交實(shí)驗(yàn)確定多糖最佳沉淀提取，結(jié)果為：濃縮液與乙醇的比例1:3.5，沉淀時(shí)間5h，離心時(shí)間15min。此條件下茶多糖的沉淀量為15.48mg。茶多糖溶液與預(yù)處理的的陰離子交換樹(shù)脂D315一起經(jīng)振蕩處理后，檢測(cè)發(fā)現(xiàn)茶多糖溶液的脫色率為65.