苦豆子總堿的毒性及HPLC法測(cè)定綿羊血漿四種苦豆子堿的研究.pdf

1、苦豆子總堿的毒性試驗(yàn)通過(guò)對(duì)小白鼠灌胃苦豆子總堿得到急性中毒的癥狀、主要靶器官、苦豆子總生物堿的半數(shù)致死量以及苦豆子總堿主要靶器官的毒性恢復(fù)性實(shí)驗(yàn)。其中以Bliss法計(jì)算其半數(shù)致死量為301.75mg·kg-1。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，苦豆子總堿的靶器官為肺臟、肝臟、腎臟、心臟和神經(jīng)系統(tǒng)。高劑量苦豆子總堿對(duì)肺臟造成損害的恢復(fù)情況較差，腦組織、肝臟和腎臟對(duì)其造成的損害恢復(fù)情況較為理想。刺激性試驗(yàn)包括苦豆子總生物堿的皮膚刺激性和眼刺激性試驗(yàn)兩部分，皮膚

2、刺激性試驗(yàn)包括了單次刺激性試驗(yàn)和多次刺激性試驗(yàn)，分為兩組:苦豆子總堿制劑組和苦豆子總堿透皮制劑組。添加的透皮促進(jìn)劑為氮酮和丙二醇。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示低濃度苦豆子總堿對(duì)皮膚和眼睛無(wú)刺激性。添加了透皮促進(jìn)劑的實(shí)驗(yàn)組對(duì)皮膚刺激性強(qiáng)度中等，主要刺激皮膚角質(zhì)層的角化不全，皮膚真皮層的纖維水腫斷裂，刺激小血管充血、出血。
　　使用島津LC-2010C液相色譜儀，建立了血漿中槐定堿、苦參堿、氧化苦參堿和槐果堿的HPLC檢測(cè)方法。血漿前處理以乙腈為蛋白

3、沉淀劑，通過(guò)紫外檢測(cè)器進(jìn)行檢測(cè)。液相色譜的流動(dòng)相為0.05moL/L的磷酸二氫鉀（磷酸氫二鉀調(diào)pH到6.45）和乙腈(A/B)，梯度洗脫。梯度洗脫程序:0.01 min-5.00min，A/B=95/5～95/5;5.00min-25.00min, A/B=95/5～88/12;25.00min-45.00min, A/B=88/12～75/25;45.00min-50.00min，A/B=75/25-95/5。檢測(cè)波長(zhǎng)225nm，流速

4、1.0mL·min-1，檢測(cè)波長(zhǎng)225nm。對(duì)苦豆子總堿的各主要組成成分獲得了良好的基線分離效果，建立了在羊血漿內(nèi)檢測(cè)苦豆子總堿的“高效液相色譜方法”，槐定堿、氧化苦參堿、苦參堿和槐果堿的保留時(shí)間分別為:14.904min，20.641min，28.612min，32.318min，目標(biāo)生物堿色譜峰分離良好。四種生物堿線性關(guān)系良好R2＞0.99，經(jīng)檢測(cè)四個(gè)實(shí)驗(yàn)組僅有苦豆子總堿透皮制劑組檢測(cè)得到了有效藥物濃度。本實(shí)驗(yàn)建立了在羊血漿內(nèi)檢測(cè)苦