氨基?；府a(chǎn)生菌米曲霉發(fā)酵條件的優(yōu)化.pdf

1、氨基?；妇哂泄鈱W(xué)異構(gòu)專一性,能夠選擇性地水解N-?；?DL-氨基酸,通過分離即可得到光學(xué)純L-或D-氨基酸。工業(yè)上利用這一特點(diǎn)可以大規(guī)模生產(chǎn)氨基酸。因此,高活力和高立體選擇性的氨基?；傅纳a(chǎn)菌株的選育和產(chǎn)酶條件的優(yōu)化,是高效、低成本制備氨基酸的基礎(chǔ)。現(xiàn)在用于氨基酸拆分的氨基?；复蠖鄟碜悦浊拱l(fā)酵,但是其產(chǎn)量和質(zhì)量遠(yuǎn)不能滿足工業(yè)生產(chǎn)的需求。為解決這一矛盾,本論文以經(jīng)過離子誘變的米曲霉為實(shí)驗(yàn)對象,通過改變它的碳源、氮源、磷酸鹽、以及它

2、們的濃度、裝液量、溫度、轉(zhuǎn)速等各種因素來尋求它的最優(yōu)發(fā)酵條件,以達(dá)到發(fā)酵條件的最優(yōu)化。探求從外界環(huán)境進(jìn)一步提高米曲霉產(chǎn)氨基酰化酶的酶活,為工業(yè)化,規(guī)?；a(chǎn)奠定基礎(chǔ)。實(shí)驗(yàn)通過單因素試驗(yàn)研究了碳源及濃度,氮源及濃度,磷酸鹽及濃度、鎂離子濃度,底物及表面活性劑等培養(yǎng)基添加物對氨基?；干a(chǎn)的影響,以及溫度、接種量、裝液量和轉(zhuǎn)速等發(fā)酵條件對產(chǎn)酶的影響。結(jié)果表明發(fā)酵最適碳源為麩皮,最適氮源為有機(jī)復(fù)合氮源(蛋白胨和尿素),最適磷酸鹽為磷酸二氫鈉。

3、實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,液態(tài)發(fā)酵的氨基?；覆皇钦T導(dǎo)酶,添加底物對酶活沒有影響。而添加表面活性劑,對氨基酰化酶的活力有抑制作用。在單因素試驗(yàn)的基礎(chǔ)上,利用正交設(shè)計(jì)法對主要因素進(jìn)行9因素3水平試驗(yàn),通過試驗(yàn)結(jié)果和方差分析確定優(yōu)化培養(yǎng)基為:麩皮1％,蛋白胨1.25%,尿素0.75%,硫酸鎂0.15%,磷酸二氫鈉0.2%,不添加底物和表面活性劑。優(yōu)化培養(yǎng)條件為:250ml三角瓶中裝入20ml培養(yǎng)基,轉(zhuǎn)速為150r/min,接種量為8%,pH為6.5,不