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1、氨基酰化酶具有光學(xué)異構(gòu)專一性,能夠選擇性地水解N-?;?DL-氨基酸,通過(guò)分離即可得到光學(xué)純L-或D-氨基酸。工業(yè)上利用這一特點(diǎn)可以大規(guī)模生產(chǎn)氨基酸。因此,高活力和高立體選擇性的氨基?;傅纳a(chǎn)菌株的選育和產(chǎn)酶條件的優(yōu)化,是高效、低成本制備氨基酸的基礎(chǔ)?,F(xiàn)在用于氨基酸拆分的氨基?;复蠖鄟?lái)自米曲霉發(fā)酵,但是其產(chǎn)量和質(zhì)量遠(yuǎn)不能滿足工業(yè)生產(chǎn)的需求。為解決這一矛盾,本論文以經(jīng)過(guò)離子誘變的米曲霉為實(shí)驗(yàn)對(duì)象,通過(guò)改變它的碳源、氮源、磷酸鹽、以及它
2、們的濃度、裝液量、溫度、轉(zhuǎn)速等各種因素來(lái)尋求它的最優(yōu)發(fā)酵條件,以達(dá)到發(fā)酵條件的最優(yōu)化。探求從外界環(huán)境進(jìn)一步提高米曲霉產(chǎn)氨基酰化酶的酶活,為工業(yè)化,規(guī)?;a(chǎn)奠定基礎(chǔ)。實(shí)驗(yàn)通過(guò)單因素試驗(yàn)研究了碳源及濃度,氮源及濃度,磷酸鹽及濃度、鎂離子濃度,底物及表面活性劑等培養(yǎng)基添加物對(duì)氨基?;干a(chǎn)的影響,以及溫度、接種量、裝液量和轉(zhuǎn)速等發(fā)酵條件對(duì)產(chǎn)酶的影響。結(jié)果表明發(fā)酵最適碳源為麩皮,最適氮源為有機(jī)復(fù)合氮源(蛋白胨和尿素),最適磷酸鹽為磷酸二氫鈉。
3、實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,液態(tài)發(fā)酵的氨基?;覆皇钦T導(dǎo)酶,添加底物對(duì)酶活沒(méi)有影響。而添加表面活性劑,對(duì)氨基?;傅幕盍τ幸种谱饔?。在單因素試驗(yàn)的基礎(chǔ)上,利用正交設(shè)計(jì)法對(duì)主要因素進(jìn)行9因素3水平試驗(yàn),通過(guò)試驗(yàn)結(jié)果和方差分析確定優(yōu)化培養(yǎng)基為:麩皮1%,蛋白胨1.25%,尿素0.75%,硫酸鎂0.15%,磷酸二氫鈉0.2%,不添加底物和表面活性劑。優(yōu)化培養(yǎng)條件為:250ml三角瓶中裝入20ml培養(yǎng)基,轉(zhuǎn)速為150r/min,接種量為8%,pH為6.5,不
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