馬尾松松針通便功能研究及其通便功能飲料研制.pdf

1、背景與目的：
　　隨著人們生活水平的提高，飲食結(jié)構(gòu)的改變及生活節(jié)奏加快等原因[1]，便秘的發(fā)病率逐年增高[2]。長期便秘不但給人的正常生活帶來諸多不便和痛苦，還會誘發(fā)和加重心血管疾病、結(jié)直腸癌[3]、老年癡呆等嚴(yán)重威脅生命安全的疾病[4]。
　　治療便秘的藥物種類繁多，但大多有毒副作用，長期用藥會產(chǎn)生成癮性和耐藥性，濫用瀉藥還容易引起結(jié)腸黑變病的產(chǎn)生[5]，因此食物輔助治療已成為人們關(guān)注的熱點。通便功能因子明確的通便功能食品

2、可安全有效地達到食物輔助治療作用[6]，因此，研制通便功能食品對治療便秘有重要意義。
　　馬尾松松針即松科松屬植物的葉，是馬尾松的主要副產(chǎn)物之一[7]。研究證實松針含有氨基酸、維生素、礦質(zhì)元素、纖維素等豐富的營養(yǎng)素及木脂素、葉綠素、黃酮類[8等活性物質(zhì)[9]，長期食用不會產(chǎn)生任何毒副作用[10]，因此，馬尾松松針可作為功能食品的原料。由于其含有豐富的膳食纖維、低聚糖、木脂素[11]、維生素B等具有通便功能的活性因子[12]，故馬尾

3、松松針也可成為研制通便因子明確的通便功能食品的原料[13]。
　　馬尾松松針通便功能食品研制至今未見報道。
　　本研究擬以含膳食纖維和低聚糖并具有抗氧化活性的馬尾松松針提取液為原料研制通便功能因子明確的通便功能食品，同時研究其通便功能機制，為馬尾松松針通便功能食品研制及食物輔助治療提供理論依據(jù)。
　　方法：
　　1馬尾松松針通便提取液的制備
　　采用高效液相色譜法檢測馬尾松松針通便提取液中低聚糖類物質(zhì);根據(jù)

4、酶-重量法[14]測定馬尾松松針通便提取液中可溶性膳食纖維的含量;總抗氧化能力（TAC）測定試劑盒法測定馬尾松松針通便提取液的總抗氧化能力。
　　2馬尾松松針通便提取液通便功能評價方法
　　通過人體試食實驗初步驗證馬尾松松針通便提取液的通便作用;按照《保健食品檢驗與評價技術(shù)規(guī)范》（2003版）中通便作用檢驗方法進行動物造模觀察各組小鼠的首次排黑便時間、6h內(nèi)排便粒數(shù)，6h內(nèi)糞便總重量和小腸墨汁推進率來評價馬尾松松針通便提取液

5、的通便效果。
　　3馬尾松松針通便提取液通便機制研究
　　參照萬錦洲等慢性便秘造模方法[15]，選用以復(fù)方地芬諾酯（5mg/kg.bw）灌胃復(fù)制出慢性便秘模型。測定小鼠大腸內(nèi)容物中大腸桿菌，乳酸桿菌，丁酸梭菌，雙歧桿菌的菌落數(shù)量以及短鏈脂肪酸如乙酸、乳酸含量；測定小鼠血清和結(jié)腸組織中乙酰膽堿和一氧化氮含量；測定小鼠結(jié)腸組織中 MDA含量以及SOD和GSH-PX活性；制作各組小鼠結(jié)腸病理切片，觀察小鼠結(jié)腸病理切片變化。

6、　　4馬尾松松針通便功能飲料的研制及其通便作用的評價
　　通過正交試驗設(shè)計優(yōu)化提取液澄清、調(diào)配及穩(wěn)定等最佳工藝參數(shù)，研制出具有通便功能且色香味最優(yōu)、衛(wèi)生質(zhì)量達到保健食品標(biāo)準(zhǔn)要求的松針復(fù)合飲料。同時采用人體試食和動物實驗評價所研制飲料的通便作用。
　　結(jié)果：
　　1馬尾松松針通便提取液制備
　　馬尾松松針通便提取液中含有通便功能因子低聚糖，尤其是木糖，可溶性膳食纖維的含量為2.8％，總抗氧化能力為178.34u/m

7、l。
　　2馬尾松松針通便提取液通便功能評價
　　人體試食實驗初步驗證馬尾松松針通便提取液具有促排便作用；馬尾松松針劑量組能顯著縮短小鼠首次排黑便時間、增加小鼠6h內(nèi)總排便重量和提高小鼠小腸墨汁推進率（P<0.05），符合通便功能結(jié)果判定要求，說明馬尾松松針通便提取液對小鼠具有通便的作用。
　　3馬尾松松針通便提取液通便機制研究
　　3.1馬尾松松針通便提取液對小鼠腸道菌群的影響
　　與空白對照組比較，馬尾

8、松松針各劑量組能增加小鼠腸道內(nèi)雙歧桿菌、丁酸梭菌、乳酸桿菌菌落數(shù)，其中松針中劑量組雙歧桿菌、丁酸梭菌與空白組比較差異有顯著統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）；松針低、中劑量組大腸菌數(shù)低于空白對照組，沒有顯著統(tǒng)計學(xué)差異（P>0.05）。
　　3.2馬尾松松針通便提取液小鼠大腸內(nèi)容物種短鏈脂肪酸含量的影響
　　松針各劑量組乳酸、乙酸含量高于空白對照組，但松針各劑量組乳酸和乙酸含量與空白對照組比較沒有顯著統(tǒng)計學(xué)差異（P>0.05）。

9、>　　3.3馬尾松松針通便提取液對小鼠血清和結(jié)腸組織中一氧化氮和乙酰膽堿含量的影響
　　馬尾松松針各劑量組小鼠血清和結(jié)腸組織中一氧化氮含量明顯低于模型對照組，乙酰膽堿含量明顯高于模型對照組，差異有顯著統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。
　　3.4馬尾松松針通便提取液對小鼠結(jié)腸抗氧化功能的影響
　　灌服馬尾松松針通便提取液組可顯著提高小鼠結(jié)腸組織的SOD、GSH-PX活性，顯著降低結(jié)腸組織中MDA含量，有顯著的統(tǒng)計學(xué)差異（P<

10、0.05）。
　　3.5馬尾松松針通便提取液小鼠結(jié)腸病理變化
　　模型對照組小鼠結(jié)腸腸絨毛減少，倒伏，腸壁變薄，消化細(xì)胞及腺體減少。松針劑量組結(jié)腸較為正常，且結(jié)腸絨毛、消化細(xì)胞及腺體與模型組比較增多。
　　4松針通便飲料最佳配方
　　松針汁20%、蜂蜜4%、蘆薈粉浸提液10%、檸檬酸0.3%、復(fù)合穩(wěn)定劑為0.05%CMC-Na+0.1%海藻酸鈉。該飲料具有松針特有的清香風(fēng)味，經(jīng)通便功能評價證實具有通便功能。