三氧化二砷聯(lián)合TRAIL對人肺癌A549細胞的影響及其機制的研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、目的: 探討三氧化二砷(AS2O3)及AS2O3聯(lián)合TRAIL對人肺腺癌A549細胞增殖、凋亡的影響及其可能機制。
  方法: 在體外培養(yǎng)人肺腺癌A549細胞株至對數(shù)生長期,隨機分為6組:對照組、1μmol/L AS2O3組、10μmol/L AS2O3組、100μg/L TRAIL組、1μmol/L AS2O3+100μg/L TRAIL組、10μmol/L AS2O3+100μg/L TRAIL組。在其分別作用24h、48h、

2、72h后采用四甲基偶氮唑藍比色(MTT)法檢測細胞生長情況;作用48h后行流式細胞儀檢測細胞凋亡率,提取總RNA及蛋白,RT-PCR檢測DR4 mRNA、DR5 mRNA、Survivin mRNA、Caspase-3 mRNA、MDR1 mRNA、MRP1 mRNA、NF-κB mRNA的表達,Western blot檢測NF-κB蛋白的表達,ELISA檢測NF-κB的活性。
  結(jié)果: 1.細胞增殖抑制率:與單藥相比,聯(lián)合藥物

3、組作用24h、48h和72h對A549的增殖抑制率明顯增強(P<0.05),并有時間和AS2O3藥物濃度依賴性。2.細胞凋亡檢測:流式細胞術(shù)檢測發(fā)現(xiàn)聯(lián)合用藥組的凋亡率比單藥組高(P<0.01),具AS2O3藥物濃度依賴性;Hoechest熒光染色法檢測發(fā)現(xiàn)聯(lián)合用藥組可見到大量凋亡細胞。3.RT-PCR檢測基因表達:AS2O3可以上調(diào) Caspase-3 mRNA的表達;聯(lián)合藥物組比單藥組明顯上調(diào) DR4 mRNA、DR5 mRNA、Ca

4、spase-3 mRNA的表達;下調(diào)Survivin mRNA、MDR1 mRNA、MRP1 mRNA、NF-κB mRNA表達。4. Western blot檢測:聯(lián)合藥物組比單藥組明顯下調(diào)NF-κB蛋白的表達。5.ELISA檢測:聯(lián)合藥物組比單藥組明顯抑制NF-κB的活性。
  結(jié)論: 本研究在體外證明AS2O3增強TRAIL對肺腺癌A549細胞的增殖抑制作用和誘導(dǎo)凋亡作用,其機制可能是1.通過死亡受體通路和線粒體通路,上調(diào)

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