熱療聯(lián)合化療對人肺癌A549細胞作用的實驗研究.pdf

1、鄭州大學(xué)碩士學(xué)位論文熱療聯(lián)合化療對人肺癌A549細胞作用的實驗研究姓名：王思華申請學(xué)位級別：碩士專業(yè)：勞動衛(wèi)生與環(huán)境衛(wèi)生學(xué)指導(dǎo)教師：吳逸明陳小玉20050530鄭州大學(xué)2005屆碩士學(xué)位論文中文摘要用量、提高療效的綜合治療方法具有臨床應(yīng)用價值，與熱療聯(lián)合是一個可以值得探討的途徑。為此，本研究用人肺癌A549細胞作為研究對象，通過MTT比色法檢測熱療分別聯(lián)合TAX和NVB對細胞生長的影響，同時采用免疫組織化學(xué)實驗和流式細胞術(shù)分析熱化療對肺

2、癌A549細胞凋亡的影響，初步研究熱療對TAX和NVB的體外增敏作用，以及熱藥聯(lián)合的體外抗瘤活性和誘導(dǎo)細胞凋亡的能力，探討其作用機制，為腫瘤患者提供熱療分別與化療藥物TAX和NVB聯(lián)合應(yīng)用的理論依據(jù)，以期為開發(fā)高效安全的臨床聯(lián)合治療方案提供科學(xué)的實驗基礎(chǔ)。材料與方法：1細胞選用人肺癌A549細胞，藥物用紫杉醇(TAx)和蓋諾(NVB)，加熱溫度是42℃。加熱容器為培養(yǎng)箱。2MIT比色法測定單純熱療，單純化療以及熱化療聯(lián)合后細胞的生長抑制

3、率。3應(yīng)用Burgi修正公式對藥物聯(lián)合熱療的相互作用類型判斷：q=(EAffEAEBEAEB)，其中EA、EB分別代表單純化療和單純熱療對細胞的抑制率，EAB為兩者聯(lián)用對細胞的抑制率。若q值大于115判為協(xié)同作用，q值介于085～115之間判為相加作用，q值小于085判為拮抗作用。4形態(tài)學(xué)觀察：以上各個藥物劑量組、熱療組和熱化療組在做MTT實驗之前，在倒置顯微鏡下觀察培養(yǎng)板內(nèi)細胞的生長狀況及形態(tài)學(xué)改變并且照相。5流式細胞儀(FcM)檢測

4、不同處理因素細胞凋亡率的變化。6免疫組織化學(xué)方法測定各個處理組作用后凋亡相關(guān)蛋白P53，HSP70，Bcl2，cMyc等的表達情況。7實驗數(shù)據(jù)采用SPSSl00統(tǒng)計軟件處理。MTT結(jié)果各組之蚓吸光值(OD值)的比較用方差分析進行統(tǒng)計；率的比較采用卡方檢驗：蛋白表達率的比較用單因素方差分析。以口=005為檢驗水準。結(jié)果：1對細胞增殖和抑制率的影響：(1)42。C單純加熱05h、1h后細胞增殖與對照相比差異無統(tǒng)計學(xué)意義(于O05)：加熱2h