TRAIL與放療聯(lián)合應(yīng)用誘導(dǎo)肺癌A549細(xì)胞凋亡的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的:
　　觀察TRAIL以及TRAIL聯(lián)合放射治療對肺癌A549細(xì)胞的體外增殖凋亡情況,并探討可能的機(jī)制。
　　方法:
　　1、取對數(shù)生長期的肺癌A549細(xì)胞,采用MTT法檢測不同濃度的TRAIL、不同劑量的X射線干預(yù)24h、48h后A549細(xì)胞的增殖抑制情況,為后續(xù)實(shí)驗(yàn)選取合適的TRAIL干預(yù)濃度及X射線照射劑量。
　　2、應(yīng)用流式細(xì)胞術(shù)檢測空白對照組、單用TRAIL組、單用X射線組及聯(lián)合組干預(yù)48h后肺癌A

2、549細(xì)胞凋亡的情況。
　　3、采用WesternBlotting檢測不同方式干預(yù)48h后各組細(xì)胞表面死亡受體DR4、DR5的表達(dá)情況。
　　結(jié)果:
　　1、MTT結(jié)果顯示,TRAIL在3.9063-500ug/ml濃度范圍內(nèi)對肺癌A549細(xì)胞的增殖具有抑制作用,并呈濃度、時(shí)間依賴關(guān)系,抑制效應(yīng)隨著TRAIL濃度的加大、干預(yù)時(shí)間的延長而增強(qiáng),24h的半數(shù)抑制濃度(IC50)為208.93ug/ml,48h的IC50為9

3、2.3ug/ml;同時(shí),X射線劑量在2-14Gy范圍內(nèi)對肺癌A549細(xì)胞的增殖具有抑制作用,且與劑量、時(shí)間呈正相關(guān),抑制效應(yīng)隨著X射線劑量的加大、干預(yù)時(shí)間的延長而增強(qiáng)。
　　2、流式細(xì)胞儀檢測結(jié)果顯示,TRAIL(20ug/ml)聯(lián)合X射線照射(8Gy)組具有明顯促進(jìn)肺癌A549細(xì)胞凋亡作用,聯(lián)合組的平均早期凋亡率為(48.78±3.09)％,單用TRAIL組為(12.33±1.99)%,單用X射線組為(17.85±1.02)%。

4、聯(lián)合組與單用組比較,平均早期凋亡率之間有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P﹤0.01)。
　　3、Westernblotting結(jié)果顯示,與單用TRAIL組、單用X射線組比較,聯(lián)合組的細(xì)胞表面死亡受體DR4、DR5表達(dá)明顯增強(qiáng)(P﹤0.05)。
　　結(jié)論:
　　1、TRAIL能夠抑制肺癌A549細(xì)胞的增殖,其抑制效應(yīng)呈濃度、時(shí)間依賴關(guān)系。
　　2、TRAIL主要通過誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡的方式抑制A549細(xì)胞的生長。
　　3、TRAIL