細(xì)胞培養(yǎng)中紫杉醇高效合成的方法及機(jī)理研究.pdf

1、紅豆杉細(xì)胞培養(yǎng)是目前解決紫杉醇藥源緊張的最有前途的方法之一。大量的研究表明，不同培養(yǎng)方式和代謝調(diào)控方法可以提高紅豆杉細(xì)胞合成紫杉醇的能力。但這些研究成果離工業(yè)化大規(guī)模生產(chǎn)還有很大的距離，主要原因在于對(duì)紫杉醇生物合成的基礎(chǔ)研究不夠深入。本文一方面研究?jī)刹脚囵B(yǎng)方式和代謝調(diào)控方法以促進(jìn)紅豆杉細(xì)胞培養(yǎng)中紫杉醇的合成，另一方面，利用cDNA-AFLP 技術(shù)探討了紫杉醇高效合成期和非高效合成期的基因表達(dá)差異。主要結(jié)論如下： 1、中國(guó)紅豆杉細(xì)

2、胞在液體培養(yǎng)條件下，其細(xì)胞干重可達(dá)到固體培養(yǎng)的1.25 倍，更適合細(xì)胞生物量的積累；而固體培養(yǎng)獲得的紫杉醇產(chǎn)量可為液體培養(yǎng)的1.18 倍，更適合紫杉醇的生物合成。 2、優(yōu)化了兩步法培養(yǎng)生產(chǎn)紫杉醇的中國(guó)紅豆杉細(xì)胞培養(yǎng)體系。對(duì)液體生長(zhǎng)培養(yǎng)和固體生長(zhǎng)培養(yǎng)分別轉(zhuǎn)到液體生產(chǎn)培養(yǎng)的兩步培養(yǎng)方式進(jìn)行了比較。固體生長(zhǎng)培養(yǎng)轉(zhuǎn)到液體生產(chǎn)培養(yǎng)的兩步培養(yǎng)方式，更適合紫杉醇的生物合成，其產(chǎn)量較另一種方式提高了22％，達(dá)到1.48mg/L。 3、在