1，5-二取代苯基-1，4-戊二烯-3-酮類化合物的生物活性篩選及作用機理初步研究.pdf

1、姜黃素具有廣譜、良好的生物活性，但其存在溶解性差、易被氧化、吸收率低等缺點。目前，以姜黃素為先導化合物合成結構更穩(wěn)定、溶解性更好、活性更高的姜黃素衍生物已成為國際新藥開發(fā)領域的一個研究熱點。 為了對姜黃素衍生物進行農藥、醫(yī)藥聯合開發(fā)，本論文以小麥赤霉病原菌(Fusarium graminearum)、辣椒枯萎病原菌(Fusarium oxysporum)、蘋果腐爛病原菌(Cytospora mandshurica)三個常見植物病

2、原菌作為供試對象，對本課題組合成的一系列結構新穎的姜黃素衍生物進行了殺菌活性篩選。另外也以雄性非依賴性前列腺癌細胞PC3、乳腺癌細胞Bcap37、胃癌細胞BGC823為模型對其進行了抗腫瘤活性篩選。同時以PC3細胞為實驗模型，對姜黃素衍生物抗腫瘤細胞增殖機理進行了初步研究，具體內容包括：(1)以MTT法對化合物抑制PC3細胞增殖的時間、濃度效應進行了分析；(2)采用乳酸脫氫酶(LDH)釋放實驗檢測了化合物對細胞膜通透性的影響；(3)利用

3、AO/EB染色實驗檢測了化合物的細胞毒性和誘導凋亡特性：(4)利用瓊脂糖凝膠電泳檢測了化合物對細胞核DNA的影響；(5)利用聚丙烯酰胺凝膠電泳檢測化合物對兩個細胞周期蛋白激酶Cdk2和Cdk4磷酸化的影響。 結果發(fā)現一個具有良好抑菌活性的姜黃素衍生物05245(1，5-二取代苯基-1，4-戊二烯-3-酮)，其在500μg/mL濃度下對小麥赤霉病原菌、辣椒枯萎病原菌、蘋果腐爛病原菌三個植物病原菌的抑制率分別可達72.98％、71.

4、43％、79.23％。它也具有很好的抑制腫瘤細胞增殖活性，其對PC3、BGC823、Bcap37三個腫瘤細胞系作用72 h的IC<,50>分別為1.78μM，2.90μM，4.08μM。另外，麻瘋樹提取物05279和酰腙衍生物cj-10也具有很好的抑制腫瘤細胞增殖的活性。為了使05245(1，5-二取代苯基-1，4-戊二烯-3-酮)的抗腫瘤細胞增殖機理具有可比性，本論文對三個化合物同時進行了研究。MTT實驗表明05245(1，5-二取代

5、苯基-1，4-戊二烯-3-酮)、05279、cj-10三個化合物都以濃度依賴方式抑制PC3細胞增殖；乳酸脫氫酶釋放實驗表明三個化合物均對PC3細胞膜有損傷；AO/EB染色實驗表明三個化合物對PC3細胞有毒性，但是熒光顯微鏡下沒有觀察到凋亡細胞；對PC3細胞DNA進行瓊脂糖凝膠電泳分析發(fā)現，三個化合物對PC3細胞沒有誘導凋亡效應；通過Western-blot對PC3細胞內兩個調控細胞周期的重要蛋白激酶Cdk2和Cdk4磷酸化的分析表明，0