血管內(nèi)皮細胞生長因子在大鼠原位肝移植慢性排斥反應(yīng)中的表達及意義.pdf

1、目的:建立大鼠原位肝移植慢性排斥反應(yīng)模型，觀察VEGF在慢性排斥反應(yīng)移植肝組織中的表達，探討其在慢性排斥反應(yīng)發(fā)生發(fā)展中的作用。
　　 方法:
　　 1.建立大鼠原位肝移植慢性排斥反應(yīng)模型：近交系Lewis大鼠為供體， BN為受體，改良Kamada二袖套法建立大鼠肝移植模型，實驗分為3組，A組：Lewis→BN+生理鹽水組(生理鹽水1ml/kg/d皮下注射，手術(shù)當天至死亡；n=20)；B組：Lewis→BN+CsA組(Cs

2、A1ml/kg/d皮下注射，手術(shù)當天至術(shù)后30d；n=32)；C組(對照組)：Lewis→Lewis+CsA組(CsA1ml/kg/d皮下注射，手術(shù)當天至術(shù)后30d；n=32)。各組分別于術(shù)后1d、6d、10d、21d、30d、60 d取肝臟組織，HE染色、VG染色、網(wǎng)狀纖維染色、CK19免疫組織化學(xué)觀察肝臟病理改變。
　　 2.免疫組織化學(xué)觀察大鼠肝移植后發(fā)生慢性排斥、急性排斥以及同品系的移植肝組織VEGF的表達。
　　

3、 結(jié)果:
　　 1.A組大鼠原位肝移植術(shù)后6d表現(xiàn)為中度急性排斥反應(yīng)，RAI評分6～7分；隨著移植時間的延長急性排斥反應(yīng)進行性加重，到10d或臨終狀態(tài)時表現(xiàn)為重度急性排斥反應(yīng)，RAI評分8～9分。
　　 2.B組隨著移植時間的延長慢性排斥反應(yīng)進行性加重，表現(xiàn)移植肝纖維化逐漸加重；匯管區(qū)膽管逐漸減少。術(shù)后60d可見典型的慢性排斥反應(yīng)表現(xiàn)：RAI評分9-12分：膽管炎性損傷；動脈管腔狹窄或完全閉塞；匯管區(qū)顯著擴大；中央靜脈

4、局灶性閉塞和不同程度的炎癥；嚴重者可見肝硬化改變。
　　 3.C組未見明顯免疫排斥反應(yīng)，RAI評分0～3分，術(shù)后6d幾乎接近生正常肝組織。
　　 4.A組、B組、C組術(shù)后1d移植肝組織均可見肝細胞VEGF表達明顯升高，之后趨勢各異。A組肝細胞VEGF表達程度隨時間推移而持續(xù)增高。B組肝細胞術(shù)后6d達到高峰后開始下降，術(shù)后10d后表達又復(fù)增強并保持較高水平。C組肝組織術(shù)后6d表達開始逐漸下降并保持較弱水平，術(shù)后60d幾乎未

5、見VEGF表達。
　　 5.術(shù)后1d各組VEGF表達差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)；術(shù)后6d，B組與A組、C組差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)。術(shù)后10d，B組表達低于A組(P＜0.05)，B組高于C組(P＜0.05)。術(shù)后60d，B組表達明顯高于C組(P＜0.05)。
　　 結(jié)論:
　　 1.近交系大鼠Lewis→BN品系組合，術(shù)后給予低劑量的免疫抑制劑CsA，肝臟病理改變符合慢性排斥反應(yīng)的特點，是研究肝移植