低濃度反式7，8-二羥-9，10環(huán)氧苯并（a）芘誘發(fā)人羊膜細(xì)胞分泌蛋白譜改變的研究.pdf

1、苯并(a)芘(B[a]P)是一種在環(huán)境中廣泛存在的污染物，主要產(chǎn)生于煙草燃燒，汽車尾氣以及油炸熏烤食品，并且具有強(qiáng)烈的致癌性。B[a]P主要通過(guò)細(xì)胞色素P450酶系代謝，代謝產(chǎn)物多達(dá)30余種，而其中反式7,8-二羥-9,10環(huán)氧苯并(a)芘(反式BPDE)能夠引起DNA的加合物形成和氧化損傷，被認(rèn)為是致突變和致癌性最強(qiáng)的一種。 作為一種已被確認(rèn)的環(huán)境致癌物，BPDE暴露的人群監(jiān)測(cè)對(duì)于環(huán)境危險(xiǎn)度的評(píng)價(jià)，尤其是對(duì)那些特殊職業(yè)暴露者和

2、有健康危險(xiǎn)行為的人來(lái)，說(shuō)無(wú)疑具有非常重要的意義。而這種監(jiān)測(cè)則依賴于一些敏感性和特異性均較好的生物標(biāo)志物。生物標(biāo)志物是一些可以測(cè)量的指標(biāo)，用來(lái)表征特定的生物狀態(tài)，特別是那些具有致病危險(xiǎn)性的反應(yīng)，疾病的發(fā)生及其所處的不同階段。它們己經(jīng)被廣泛地運(yùn)用于疾病的早期診斷、疾病的亞型分類、疾病的進(jìn)展檢測(cè)、疾病的治療效果和預(yù)后的評(píng)估以及人群健康檢測(cè)等各個(gè)方面。而蛋白質(zhì)作為細(xì)胞各項(xiàng)功能的最終執(zhí)行者，同時(shí)也是最常見的疾病攻擊/治療靶點(diǎn)，是最為理想的生物標(biāo)志

3、物，也一直是研究的熱點(diǎn)。 目前，蛋白質(zhì)組學(xué)分析已經(jīng)成為了篩選生物標(biāo)志物的主流策略，因?yàn)樗軌驈恼w上來(lái)分析蛋白質(zhì)表達(dá)譜的改變，并進(jìn)行后續(xù)鑒定，具有以往低通量技術(shù)如免疫印跡法等無(wú)可比擬的高效性。而從臨床和人群監(jiān)測(cè)的實(shí)際性考慮，那些用來(lái)檢測(cè)的標(biāo)本往往是通過(guò)無(wú)創(chuàng)性的手段獲得的，比如血液，唾液，尿液等等，因而最理想的生物標(biāo)志物應(yīng)當(dāng)是由細(xì)胞分泌或者滲漏到這些體液中的蛋白質(zhì)。但在血液等標(biāo)本中，作為生物標(biāo)志物的分泌蛋白往往己經(jīng)被大大地稀釋了，

4、從而被那些高豐度的組成性蛋白(如血清白蛋白)所掩蓋而無(wú)法得到效檢測(cè)。 因此，在本研究中，我們收集了培養(yǎng)細(xì)胞的上清作為體液的一種較好的替代，來(lái)避免高豐度蛋白的干擾，并用雙向凝膠電泳(2-DE)和基質(zhì)輔助激光解吸-飛行時(shí)間質(zhì)譜(MALDI-TOF MS)來(lái)分析BPDE處理的細(xì)胞和對(duì)照組細(xì)胞間的差異分泌組，尋找潛在的生物標(biāo)志物。 研究表明，雙向電泳-質(zhì)譜鑒定的蛋白質(zhì)組學(xué)方法是一種非常有效的篩選生物標(biāo)志物的策略，而對(duì)BPDE處理