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文檔簡介
1、[目的]
本實驗以新生SD大鼠為實驗對象,觀察腹腔注射DMOG(脯氨酰羥化酶抑制劑:二甲基乙二?;拾彼幔π律笫蠓谓M織HIF-1和VEGF表達(dá)的影響,觀察HIF-1對新生大鼠肺血管發(fā)育的影響,探討HIF-1對肺發(fā)育影響的機(jī)制。
[方法]
1.將自然分娩的73只新生SD大鼠通過抽簽法抽取64只,再將64只新生SD大鼠通過隨機(jī)數(shù)字表法隨機(jī)分為兩組:實驗組和正常對照組,每組各32只。實驗組新生SD大鼠腹腔注射
2、DMOG(劑量:40mg·kg-1·d-1),正常對照組新生大鼠腹腔注射等體積生理鹽水。兩組于實驗第4天、7天、10天和14天分別隨機(jī)抽取8只大鼠后處死。
2.對兩組大鼠肺組織進(jìn)行HE染色,光鏡下觀察形態(tài)學(xué)改變,并進(jìn)行放射性肺泡計數(shù)(RAC)。
3.采用實時熒光定量PCR(RT-PCR)檢測兩組大鼠肺組織HIF-1α和VEGFmRNA表達(dá)水平。采用蛋白質(zhì)免疫印跡(Western Blotting)方法檢測兩組大鼠肺組
3、織HIF-1α和VEGF蛋白表達(dá)水平。
4.所有實驗數(shù)據(jù)均以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示,用SPSS19.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)分析。
[結(jié)果]
1.肺組織形態(tài)學(xué)觀察:相同日齡,實驗組大鼠肺組織RAC值均高于正常對照組大鼠,差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。相同日齡,實驗組大鼠肺間隔亦較正常對照組薄。相同日齡,實驗組大鼠肺發(fā)育程度較正常對照組大鼠成熟。
2.大鼠肺組織HIF-1α mRNA和蛋白表達(dá)水平:相同日齡
4、,兩組大鼠肺組織HIF-1α mRNA相對表達(dá)量無顯著性差異(P>0.05),隨著日齡增大,兩組大鼠肺組織HIF-1αmRNA相對表達(dá)量整體均無顯著性差異(P>0.05)。相同日齡,實驗組大鼠肺組織HIF-1α表達(dá)量高于正常對照組大鼠,差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05),隨著日齡增大,兩組大鼠肺組織HIF-1α表達(dá)量整體均存在差異,差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。
3.大鼠肺組織VEGF mRNA和蛋白表達(dá)水平:相同日齡,
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