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文檔簡(jiǎn)介
1、目的:
通過(guò)研究香煙煙霧暴露致大鼠肺動(dòng)脈高壓時(shí)大鼠肺組織中缺氧誘導(dǎo)因子(hypoxiainduciblefactor,HIF)-1α及核因子(nuclearfactor,NF)-κBp65的表達(dá)變化,來(lái)探討煙霧暴露致大鼠肺動(dòng)脈高壓的可能發(fā)生機(jī)制。
方法:
健康雄性Wistar大鼠40只,隨機(jī)分為對(duì)照組、煙霧暴露4、8、12周組,每組10只。將煙霧暴露組大鼠置于自制的實(shí)驗(yàn)性大鼠被動(dòng)吸煙箱內(nèi)進(jìn)行被動(dòng)
2、吸煙,給予每次吸煙15支(每支香煙燃燒約10min,換煙時(shí)停止5min),每天上、下午各1次,每周6天,分別香煙煙霧暴露4、8、12周,對(duì)照組除不香煙煙霧暴露外,其他條件完全相同。各組大鼠模型制備成功后,右心導(dǎo)管法測(cè)大鼠肺動(dòng)脈平均壓(meanpulmonaryarterialpressure,mPAP),無(wú)菌條件下完整游離心、肺組織,計(jì)算大鼠右心肥厚指數(shù)(rightventriclehypertrophyindex,RVHI),取左肺組
3、織置于-80℃冰箱凍存,用熒光定量PCR測(cè)各組大鼠肺組織HIF-1αmRNA的相對(duì)表達(dá)量,取右肺組織常規(guī)石蠟包埋、切片,用于HE染色,免疫組織化學(xué)染色測(cè)大鼠肺組織中HIF-1α及NF-κBp65蛋白的表達(dá),分析各指標(biāo)的相關(guān)性。
結(jié)果:
①煙霧暴露8周組大鼠及12周組大鼠mPAP(14.70±1.125,17.83±2.437)明顯高于4周組及對(duì)照組(11.88±1.536,10.67±1.125),差異有統(tǒng)計(jì)
4、學(xué)意義(P均<0.01);煙霧暴露12周組(17.83±2.437)高于8周組(14.70±1.125),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01):煙霧暴露4周組與對(duì)照組組間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(10.67±1.125、11.88±1.536)(P>0.05)。②煙霧暴露12周組大鼠RVHl(0.26±0.006)高于對(duì)照組(0.22±0.020),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01);對(duì)照組、煙霧暴露4周組及8周組各組組間差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(0.22
5、±0.020、0.23±0.020、0.24±0.020)(P均>0.05)。③煙霧暴露12周組大鼠肺組織中HIF-1αmRNA相對(duì)表達(dá)量(1.36±0.185)及8周組(1.17±0.211)明顯高于4周組(0.92±0.141)及對(duì)照組(0.76±0.137),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P均<0.01);煙霧暴露12周(1.36±0.185)高于8周組(1.17±0.211),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01);煙霧暴露4周組與對(duì)照組組間差異
6、無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。④煙霧暴露4、8、12周組大鼠肺血管平滑肌中HIF-1α蛋白(0.204±0.005、0.235±0.004、0.249±0.003)的表達(dá)明顯高于對(duì)照組(0.077±0.003),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P均<0.01):煙霧暴露12周組(0.690±0.003)及8周組(0.573±0.003)明顯高于4周組(0.478±0.003),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P均<0.01);煙霧暴露12周組(0.249±0.00
7、3)明顯高于8周組(0.235±0.004),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。⑤煙霧暴露4、8、12周組大鼠肺氣道上皮細(xì)胞NF-κBp65蛋白(0.478±0.003、0.573±0.003、0.690±0.003)的表達(dá)明顯高于對(duì)照組(0.308±0.005),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P均<0.01);煙霧暴露8、12周組(0.573±0.003、0.690±0.003)明顯高于4周組(0.478±0.003),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P均<0
8、.01);煙霧暴露12周組(0.690±0.003)明顯高于8周組(0.573±0.003),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。⑥大鼠mPAP與RVHI呈正相關(guān)(r=0.478,P<0.01);HIF-1α蛋白的表達(dá)與mPAP、RVHI、HIF-1αmRNA的相對(duì)表達(dá)量及NF-κBp65蛋白的表達(dá)均呈正相關(guān)(r=0.688、r=0.497、r=0.706、r=0.877,p均<0.01).
結(jié)論:
香煙煙霧暴
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