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文檔簡介
1、目的:以Ghrelin介導的腦腸軸失衡機制為中心,觀察電針對FD模型大鼠一般情況評分、胃殘留量和小腸墨汁推進率、腦腸肽Ghrelin及其受體在胃竇、下丘腦和海馬組織的表達。探討Ghrelin在FD發(fā)病中的作用以及電針對Ghrelin介導的FD大鼠腦腸軸失衡的調節(jié)作用。
方法:選取體重為180±20g的SPF級SD大鼠80只。實驗前所有大鼠置于鼠籠常規(guī)適應性喂養(yǎng)一周后,隨機數字表法將80只大鼠隨機分為正常對照組、模型對照組、藥物
2、干預組和電針干預組,每組20只。正常對照組造模期間遠離造模環(huán)境,避免造模環(huán)境干擾,余三組大鼠采用夾尾造模法復制FD模型大鼠。治療階段,正常對照組和模型對照組大鼠每日定時抓捕,不進行任何其它處理;藥物干預組大鼠采用西沙比利片稀釋的西沙比利溶液灌胃治療,日一次,連續(xù)治療6次為一個療程,休息一天后進入第二個療程,共治療2個療程;電針干預組大鼠每日針刺雙側“足三里”穴(直刺0.3-0.5寸)和“太沖”穴(斜刺0.1-0.2寸),快速捻轉至針下沉
3、澀感后,接韓式穴位神經刺激儀:等幅疏密波、頻率2/15Hz、強度2mA,部分大鼠可見以下肢輕微顫抖。每次30min,日一次,連續(xù)治療6次為一個療程,休息一天后進入第二個療程,共治療2個療程。觀察電針對FD大鼠一般情況評分、體重日增長、進食、飲水量、胃內殘留率、小腸墨汁推進率相關指標;運用顯微鏡觀察胃竇平滑肌組織病理形態(tài)學;采用酶聯免疫吸附測定法檢測血漿Ghrelin濃度值;運用免疫組化法觀察各組大鼠胃、下丘腦和海馬Ghrelin蛋白的表
4、達;采用實時定量熒光PCR法觀察各組大鼠胃、下丘腦和海馬GHS-R mRNA的表達。
結果:(1)和正常對照組相比,FD模型大鼠在造模階段一般情況評分、日增長體重、日進食量、日飲水量均明顯下降(P<0.01);在治療階段,通過電針和藥物治療后,電針干預組和藥物干預組大鼠一般情況評分、日增長體重、日進食量、日飲水量均較前增加,和同組造模階段相比有統(tǒng)計學差異(P<0.05,P<0.01);而且,電針干預組大鼠日增長體重較藥物干預組
5、進一步增加(P<0.01)。(2)各組大鼠胃腸組織形態(tài)學未發(fā)現器質性改變,肉眼觀察僅模型對照組胃黏膜顏色偏白,余三組胃組織黏膜未見潰瘍、出血或炎癥反應,在光鏡下檢查(×400)發(fā)現僅模型對照組胃組織有少許中性粒細胞。(3)和正常對照組相比,FD模型大鼠胃內殘留率增加(P<0.05),小腸墨汁推進率下降(P<0.01),與模型組比較,電針干預組和藥物干預組大鼠胃內殘留率均明顯減少(P<0.01),小腸墨汁推進率明顯上升(P<0.01),電
6、針干預組和藥物干預組組間比較差異沒有顯著性。(4)和正常對照組相比,FD模型大鼠外周血漿、胃、中樞下丘腦和海馬組織中Ghrelin濃度均下降(P<0.05),電針可以上調FD模型大鼠外周血漿、胃組織、中樞下丘腦和海馬組織中Ghrelin含量(P<0.05、P<0.01),但藥物西沙比利溶液僅能上調FD大鼠胃和海馬組織中Ghrelin含量(P<0.05),不能上調大鼠外周血漿、中樞下丘腦和Ghrelin含量(P>0.05)。(5)與正常對
7、照組比較,FD模型大鼠胃、下丘腦和海馬組織GHS-R mRNA表達均下降(P<0.05);與模型對照組比較,藥物干預組和電針干預組胃組織、下丘腦組織、海馬組織GHS-R mRNA表達上升明顯(P<0.05);與藥物干預組比較,電針能明顯促進海馬組織GHS-R mRNA表達。
結論:(1)夾尾法復制FD大鼠一般情況評分、體重日增長和日進食量降低,胃內殘留率增加,小腸墨汁推進率下降,外周血漿、胃黏膜、下丘腦和海馬組織中Ghreli
8、n濃度、胃、下丘腦和海馬組織GHS-R mRNA表達均下降。FD大鼠腦腸軸這座橋梁上的信使之一Ghrelin及其受體表達低于正常,Ghrelin參與了FD大鼠腦腸軸失衡。
?。?)電針和西沙比利溶液均能有效改善FD大鼠的一般情況評分、促進進食和體重日增長、促進胃排空和小腸推動力,在改善一般情況評分和體重日增長方面電針明顯優(yōu)于西藥組,為電針替代西藥治療FD提供實驗依據。
?。?)電針可顯著促進FD大鼠外周血漿、胃組織、中樞
9、下丘腦、海馬組織中Ghrelin蛋白表達,而西沙比利僅能促進外周胃組織和中樞海馬組織Ghrelin蛋白表達,對FD大鼠外周血漿、下丘腦Ghrelin蛋白表達沒有影響,提示電針對Ghrelin的調控是多方面的,優(yōu)于藥物干預組。
?。?)電針和西沙比利溶液都可顯著促進FD大鼠胃、下丘腦和海馬組織Ghrelin受體(GHS-R)mRNA的表達,但在調節(jié)海馬組織Ghrelin受體(GHS-R)mRNA的表達方面,電針組優(yōu)于西沙比利組
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