RECQ1解旋酶在人腦膠質(zhì)瘤中的表達(dá)及意義.pdf

1、目的:
　　 人腦膠質(zhì)細(xì)胞瘤是原發(fā)生神經(jīng)外胚層的腫瘤。據(jù)統(tǒng)計(jì)，我國人腦膠質(zhì)細(xì)胞瘤發(fā)病率為3-6/10萬人/年，年死亡人數(shù)可達(dá)3萬人。其中以星形細(xì)胞瘤最為常見，其次為多形性膠質(zhì)母細(xì)胞瘤。膠質(zhì)瘤的發(fā)生性別以男性多見，特別是多形性膠質(zhì)母細(xì)胞瘤，并且多形性膠質(zhì)母細(xì)胞瘤多見于中年人群。基于諸多醫(yī)學(xué)難題及社會問題膠質(zhì)瘤尤其是多形性膠質(zhì)母細(xì)胞瘤的治療與研究備受各界關(guān)注。Ki-67作為一級證據(jù)，是判斷腫瘤預(yù)后的重要指標(biāo)，是最廣泛的增殖細(xì)胞標(biāo)記。

2、p53是一種腫瘤抑制基因，已成為判斷膠質(zhì)瘤級別的二級證據(jù)，另有研究顯示，其調(diào)控RecQ解旋酶(BLM和WRN)的功能。
　　 RecQ1解旋酶在保持基因組穩(wěn)定性方面具有重要作用，在人類，RecQ1解旋酶與易患腫瘤及早期衰老密切相關(guān)。目前證據(jù)表明，RecQ1解旋酶缺失能夠?qū)е滦∈竽[瘤細(xì)胞有絲分裂發(fā)生突變，產(chǎn)生抑制腫瘤生長的功能。本實(shí)驗(yàn)意在觀察人腦膠質(zhì)細(xì)胞瘤和正常腦組織的RecQ1解旋酶在不同級別膠質(zhì)瘤中表達(dá)和在正常對照組織中表達(dá)差

3、異，同時觀察RecQ1解旋酶在人腦膠質(zhì)細(xì)胞瘤中的表達(dá)與p53、Ki-67的相關(guān)性，以此來判斷RecQ1是否可作成為人腦膠質(zhì)瘤惡性程度及預(yù)后指標(biāo)，并為膠質(zhì)瘤的基因治療提供可行性理論基礎(chǔ)。
　　 方法:
　　 選擇2012年1月至2013年1月期間，在河北醫(yī)科大學(xué)第二醫(yī)院神經(jīng)外科住院治療的腦膠質(zhì)細(xì)胞瘤患者64例（以WHO分級為標(biāo)準(zhǔn)，將第1、Ⅱ級膠質(zhì)瘤歸為低級別組，第Ⅲ、Ⅳ級膠質(zhì)瘤歸為高級別組），本實(shí)驗(yàn)含低級別膠質(zhì)瘤23例，高

4、級別膠質(zhì)瘤含41例，并選擇健康成年人（外傷或其他病因所致腦膨出病人術(shù)中所取腦組織），11例作為對照組。術(shù)中取瘤，福爾馬林常規(guī)固定并妥善保存。統(tǒng)一采用免疫組化法（均在同一實(shí)驗(yàn)室，同樣的實(shí)驗(yàn)條件下進(jìn)行），驗(yàn)查所取腫瘤組織RecQ1解旋酶及p53、Ki-67表達(dá)情況，并與健康腦組織組做對比。
　　 數(shù)據(jù)獲得和統(tǒng)計(jì)方法:各染色標(biāo)本分別在高倍鏡下(×400)取5個視野，數(shù)陽性染色細(xì)胞數(shù)（細(xì)胞核著棕黃色），求平均數(shù)為該標(biāo)本所得結(jié)果。用SPS

5、S16.0版軟件分析數(shù)據(jù)，資料用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（x±s）記錄，采用Kruskal-Wallis秩和及t檢驗(yàn)，相關(guān)性檢驗(yàn)應(yīng)用pearson線性相關(guān)性檢驗(yàn)。
　　 結(jié)果:
　　 1、RecQ1與膠質(zhì)瘤發(fā)生與級別間的關(guān)系
　　 本實(shí)驗(yàn)設(shè)有11例正常腦組織作為正常對照組，在正常對照組中的RecQ1表達(dá)結(jié)果為1.73±1.27;腦膠質(zhì)瘤組(64例)，分別為低級別組(23例)表達(dá)結(jié)果為26.57±7.99，高級別組(41例)結(jié)

6、果為41.61±8.00，三組樣本符合正態(tài)分布，但方差不齊，使用Kruskal-Wallis秩和檢驗(yàn):正常對照組平均秩次為6.00;低級別膠質(zhì)瘤組平均秩次為28.85;高級別膠質(zhì)瘤組平均秩次為52.84。Chi-square統(tǒng)計(jì)量為48.79，P＜0.05。同時使用t檢驗(yàn)(a=0.05)分析低級別膠質(zhì)瘤與高級別膠質(zhì)瘤RecQ1表達(dá)結(jié)果顯示:統(tǒng)計(jì)結(jié)果分別為26.57±7.99和41.61±7.99，t=-2.726，P＜0.05。

7、　　 2、P53與膠質(zhì)瘤發(fā)生及級別間的關(guān)系
　　 實(shí)驗(yàn)設(shè)11例正常腦組織，在該組中的p53表達(dá)值為2.09±1.22;設(shè)立腦膠質(zhì)瘤組（64例），分為低級別組23例結(jié)果為22.57±8.03，高級別組41例結(jié)果為29.07±5.80，三樣本方差不齊，使用Kruskal-Wallis秩和檢驗(yàn):正常對照組平均秩次為6.00;低級別膠質(zhì)瘤組平均秩次為33.70;高級別膠質(zhì)瘤組平均秩次為49.00。Chi-square統(tǒng)計(jì)量為35.20

8、，P＜0.05。同時使用t檢驗(yàn)(a=0.05)分析低級別膠質(zhì)瘤與高級別膠質(zhì)瘤p53表達(dá)結(jié)果顯示:分別為22.57±8.03和29.07±5.80，t=-3.741，P＜0.05。
　　 3、Ki-67與膠質(zhì)瘤及級別間的關(guān)系
　　 實(shí)驗(yàn)設(shè)11例正常腦組織，在該組中的ki-67表達(dá)值為3.27±2.53;設(shè)立腦膠質(zhì)瘤組(64例)，分為低級別組23例結(jié)果為14.30±6.30，高級別組41例結(jié)果為74.24±8.90，三樣本方

9、差不齊，使用Kruskal-Wallis秩和檢驗(yàn):正常對照組平均秩次為6.68;低級別膠質(zhì)瘤組平均秩次為22.67;高級別膠質(zhì)瘤組平均秩次為55.00。Chi-square統(tǒng)計(jì)量為59.08，P＜0.05。同時使用t檢驗(yàn)（a=0.05）分析低級別膠質(zhì)瘤與高級別膠質(zhì)瘤ki-67表達(dá)結(jié)果顯示:分別為14.30±6.30和74.24±8.90，t=-28.48，P＜0.05。
　　 4、膠質(zhì)瘤中RecQ1、P53、Ki-67相關(guān)性

10、r>　　 實(shí)驗(yàn)設(shè)有64例腦膠質(zhì)瘤組織（低級別組23例，高級別組41例），檢測其各級別中RecQ1表達(dá)值分別與標(biāo)本來源相同的患者的膠質(zhì)瘤組織p53、ki-67表達(dá)值進(jìn)行相關(guān)性檢驗(yàn)，做散點(diǎn)圖，并采用pearson線性相關(guān)性檢驗(yàn)示他們的變化相關(guān)性（a=0.05）。結(jié)果顯示:在膠質(zhì)瘤中，ReeQ1與p53相關(guān)系數(shù)為0.294，P=0.018，P＜0.05;RecQ1與ki-67相關(guān)系數(shù)為0.662，P=0.000，P＜0.05。另外，分別檢測

11、各級別膠質(zhì)瘤組中三者相關(guān)性，結(jié)果顯示:低級別組膠質(zhì)瘤組RecQ1與p53相關(guān)系數(shù)為-0.170，P=0.439，P＞0.05，RecQ1與ki-67相關(guān)系數(shù)為0.004，P=0.987，P＞0.05;高級別組RecQ1與p53相關(guān)系數(shù)為0.139，P=0.387，P＞0.05，RecQ1與ki-67相關(guān)系數(shù)為0.073，P=0.648，P＞0.05。
　　 結(jié)論:
　　 1、高級別及低級別腦膠質(zhì)瘤組與正常對照組腦組織Re

12、cQ1表達(dá)之間有明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，腦膠質(zhì)瘤組明顯高于正常對照組。提示:RecQ1在膠質(zhì)瘤中存在高表達(dá)。
　　 2、腦膠質(zhì)瘤組內(nèi)的RecQ1、p53、ki-67表達(dá)，高級別組高于低級別組，兩組間均存在差異，且具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。提示:RecQ1、p53、ki-67表達(dá)情況與膠質(zhì)瘤惡性程度存在正相關(guān)性。
　　 3、在膠質(zhì)瘤組中RecQ1表達(dá)與Ki-67及p53表達(dá)相似，都隨著膠質(zhì)瘤級別增加而呈現(xiàn)表達(dá)增高。這表明RecQ1可能成為判

13、斷人腦膠質(zhì)細(xì)胞瘤惡性程度或預(yù)后的新指標(biāo);但在低級別膠質(zhì)瘤組或高級別膠質(zhì)瘤組中三者間沒有線性相關(guān)關(guān)系。這又表明，ReeQ1區(qū)別于經(jīng)典的抑癌基因和核增值抗原而相對獨(dú)立存在，它可能成為膠質(zhì)瘤基因治療的新靶點(diǎn)。
　　 RecQ1在各級別膠質(zhì)瘤中存在不同程度的表達(dá);高級別膠質(zhì)瘤存在高表達(dá)，細(xì)胞核著色;膠質(zhì)瘤中RecQ1表達(dá)與Ki-67及p53相似，均隨膠質(zhì)瘤級別增加而增高。但在低級別膠質(zhì)瘤組或高級別膠質(zhì)瘤組中RecQ1表達(dá)與Ki-67及p