MAGE-A4在人腦膠質(zhì)瘤中的表達(dá)及臨床意義.pdf

1、目的:膠質(zhì)瘤是神經(jīng)系統(tǒng)最常見的原發(fā)腫瘤。目前，其治療方法主要有手術(shù)、放療及化療，但總體療效并不理想。腫瘤免疫治療是一種特異性更強(qiáng)、副作用更小的腫瘤治療方式，其關(guān)鍵是確定理想的免疫治療靶點(diǎn)。黑色素瘤抗原基因(melanoma associated antigen gene，MAGE)是癌-睪丸抗原(cancer testis antigen，CTA)中的一員，其表達(dá)特點(diǎn)是在多種腫瘤組織中有表達(dá)，而在正常組織僅表達(dá)于睪丸生殖細(xì)胞和胎盤組織，

2、故可作為腫瘤免疫治療的理想靶點(diǎn)。MAGE-A4是MAGE家族的一個成員，其在一些腫瘤中的表達(dá)及意義已進(jìn)行了初步研究，但是關(guān)于MAGE-A4在腦膠質(zhì)瘤中的表達(dá)情況未見報道。本研究旨在觀察MAGE-A4 mRNA在正常腦組織、正常睪丸組織及腦膠質(zhì)瘤中的表達(dá)情況，探討腦膠質(zhì)瘤患者M(jìn)AGE-A4作為臨床免疫治療靶點(diǎn)的可能及MAGE-A4 mRNA表達(dá)與臨床參數(shù)的關(guān)系。
　　方法:收集腦膠質(zhì)瘤住院患者且接受手術(shù)治療的病例78例，標(biāo)本均來自于

3、河北醫(yī)科大學(xué)第四醫(yī)院神經(jīng)外科2009年2月～2012年2月標(biāo)本。年齡在15～75歲之間，中位年齡45歲，其中男性40例，女性38例。在手術(shù)前由有經(jīng)驗(yàn)的神經(jīng)科醫(yī)師對病人進(jìn)行功能狀態(tài)KPS評分（Karnofsky評分）。KPS評分標(biāo)準(zhǔn)是由美國東部腫瘤協(xié)作組提出，該評分可依據(jù)患者活動情況、病情程度、生活自理程度，對患者機(jī)體活動狀態(tài)進(jìn)行評價，10分一個等級對患者進(jìn)行評分，滿分為100分。KPS評分80分及以上的患者具有獨(dú)立生存能力，評分在50至

4、70分的患者生活需要部分照顧。為確定腫瘤大小根據(jù)患者術(shù)前頭顱CT、MRI測量腫瘤最大直徑。手術(shù)中取出標(biāo)本后立即置入液氮罐中并迅速轉(zhuǎn)運(yùn)到-80℃冰箱保存。術(shù)后病理證實(shí)均為腦膠質(zhì)瘤且術(shù)前未接受手術(shù)、放療和化療。根據(jù)WHO2000對膠質(zhì)瘤組織進(jìn)行病理分級:包括Ⅰ級11例，Ⅱ級26例，Ⅲ級27例，Ⅳ級14例。將Ⅰ～Ⅱ級膠質(zhì)瘤稱為低級別膠質(zhì)瘤，Ⅱ～Ⅳ級膠質(zhì)瘤歸為高級別膠質(zhì)瘤。術(shù)后通過電話，郵件或復(fù)診的方式，隨訪患者1、3、5年的生存情況。本次研究

5、采用逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)(reverse transcription polymerase chainreaction，RT-PCR)技術(shù)從轉(zhuǎn)錄水平上檢測78例腦膠質(zhì)瘤中MAGE-A4的表達(dá)，并以7例正常睪丸組織（均為前列腺癌去勢手術(shù)患者的睪丸組織）作為陽性對照，12例正常腦組織（均為車禍死亡患者捐獻(xiàn)或去骨瓣減壓中去除的腦組織）作為陰性對照?；仡櫺苑治鯩AGE-A4基因表達(dá)與膠質(zhì)瘤患者臨床參數(shù)（包括年齡、性別、腫瘤大小、術(shù)前KPS評分、病

6、理級別）的關(guān)系?？偵嫫谑侵甘中g(shù)之日起到患者死亡的時間。采用Kaplan-Meier統(tǒng)計方法分析MAGE-A4 mRNA的表達(dá)及臨床參數(shù)與膠質(zhì)瘤患者總生存期的關(guān)系。進(jìn)一步對病理分級及KPS評分進(jìn)行多因素分析。
　　結(jié)果:
　　1.MAGE-A4 mRNA在正常睪丸組織、正常腦組織及膠質(zhì)瘤組織中的表達(dá)7例正常睪丸組織中均發(fā)現(xiàn)MAGE-A4 mRNA表達(dá)，陽性率為100％。而在12例正常腦組織中均無MAGE-A4 mRNA的表達(dá)

7、，陽性率0％。78例腦膠質(zhì)瘤組織中有37例MAGE-A4基因表達(dá)陽性，陽性率為47.44％。MAGE-A4在膠質(zhì)瘤中的表達(dá)與正常腦組織相比有統(tǒng)計學(xué)差異(x2=9.666，P=0.002)。
　　2.MAGE-A4 mRNA的表達(dá)與腦膠質(zhì)瘤患者臨床參數(shù)的關(guān)系
　　2.1 MAGE-A4 mRNA的表達(dá)與性別的關(guān)系40例男性病例中，有20例MAGE-A4 mRNA表達(dá)陽性，陽性率為50.00％;而38例女性中，有17例MAGE-

8、A4 mRNA表達(dá)陽性，陽性率為44.74％。經(jīng)統(tǒng)計學(xué)分析，兩者之間的比較未見統(tǒng)計學(xué)差異(x2=0.216，P=0.642)。
　　2.2 MAGE-A4 mRNA的表達(dá)與年齡的關(guān)系。
　　50歲以下的腦膠質(zhì)瘤病例共有47例，有26例MAGE-A4 mRNA表達(dá)陽性，陽性率為55.32％;50歲及以上的病例共有31例，有12例MAGE-A4 mRNA表達(dá)陽性，陽性率為38.71％。兩者之間進(jìn)行比較未見統(tǒng)計學(xué)差異（x2=2.0

9、63，P=0.151）。
　　2.3 MAGE-A4 mRNA的表達(dá)與KPS評分的關(guān)系。
　　對每位患者M(jìn)AGE-A4 mRNA表達(dá)情況及術(shù)前的KPS評分進(jìn)行統(tǒng)計分析，70分以下共有42例，其中22例MAGE-A4 mRNA表達(dá)陽性，陽性率為52.38％;70分以上共36例，其中15例MAGE-A4 mRNA表達(dá)陽性，陽性率為41.67％。兩者之間的比較未見統(tǒng)計學(xué)差異(x2=0.892，P=0.345)。
　　2.4

10、MAGE-A4 mRNA的表達(dá)與腫瘤大小的關(guān)系。
　　將腫瘤最大直徑進(jìn)行比較，5cm以下的病例共有20例，其中有11例MAGE-A4 mRNA表達(dá)陽性，陽性率55.00％，5cm及以上病例共有58例，其中26例表達(dá)陽性，陽性率為44.83％。兩者之間進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)分析未見統(tǒng)計學(xué)差異（x2=0.617，P=0.432）。
　　2.5 MAGE-A4 mRNA的表達(dá)與病理分級的關(guān)系。
　　根據(jù)病理結(jié)果，78例標(biāo)本中，低級別腦膠

11、質(zhì)瘤（Ⅰ～Ⅱ級）共37例，其中12例MAGE-A4 mRNA表達(dá)陽性，陽性率為32.43％;高級別腦膠質(zhì)瘤（Ⅲ～Ⅳ級）共41例，其中25例MAGE-A4 mRNA表達(dá)陽性，陽性率為60.98％。統(tǒng)計學(xué)分析表明兩者有顯著的統(tǒng)計學(xué)差異(x2=6.355，P=0.012)。
　　3.MAGE-A4 mRNA在腦膠質(zhì)瘤中的表達(dá)與患者臨床預(yù)后之間的關(guān)系MAGE-A4表達(dá)陽性組共37例，中位生存期為24個月，其中總生存期達(dá)1年者占77.7％，

12、3年者占37.3％，5年者占9.3％;MAGE-A4表達(dá)陰性組共41例，中位生存期為20個月，其中總生存期達(dá)1年者占85.2％，3年者占36.7％，5年者占9.5％。用Kaplan-Meier法對MAGE-A4陽性表達(dá)組總生存期與陰性表達(dá)組總生存期進(jìn)行分析發(fā)現(xiàn)兩者未見顯著的統(tǒng)計學(xué)差異（x2=0.007，P=0.935）。
　　4.臨床參數(shù)與膠質(zhì)瘤患者預(yù)后之間的關(guān)系采用單因素分析結(jié)果表明臨床參數(shù)中的性別、年齡、腫瘤大小均與膠質(zhì)瘤患者

13、的預(yù)后無關(guān)，而與病理級別相關(guān)（P=0.000）;與KPS評分相關(guān)(P=0.013)。進(jìn)一步通過多因素分析，與低級別膠質(zhì)瘤（Ⅰ～Ⅱ級）相比，高級別膠質(zhì)瘤（Ⅲ～Ⅳ級）的死亡風(fēng)險要高3.175倍。術(shù)前KPS評分70分以下的死亡風(fēng)險是70分及以上患者的2.045倍。
　　結(jié)論:
　　1.在正常腦組織中無MAGE-A4基因的表達(dá)，在正常睪丸組織中均有MAGE-A4基因表達(dá)。
　　2.在腦膠質(zhì)瘤組織中，MAGE-A4有特異性表達(dá)，