IL-10基因多態(tài)性與CKD1期濕熱體質(zhì)相關(guān)性研究.pdf

1、目的:
　　通過(guò)對(duì)白細(xì)胞介素-10基因-592位點(diǎn)單核苷酸多態(tài)性與慢性腎臟病1期患者濕熱體質(zhì)的相關(guān)性研究，探討白細(xì)胞介素-10基因-592位點(diǎn)單核苷酸多態(tài)性作為慢性腎臟病1期患者濕熱體質(zhì)分型的客觀指標(biāo)的合理性。
　　方法:
　　自2014年3月至今，從廣東省中醫(yī)院腎內(nèi)科住院部和門診部挑選出符合條件的慢性腎臟病1期（CKD1期）患者，經(jīng)患者知情同意后，應(yīng)用中醫(yī)《體質(zhì)量表》及《中醫(yī)體質(zhì)分類與判定》對(duì)其進(jìn)行體質(zhì)判定并統(tǒng)一劃分

2、為CKD1期濕熱質(zhì)組（共29例）及CKD1期平和質(zhì)組（共31例）。用EDPA管抽取2ml全血進(jìn)行離心，棄去上清液，保留沉淀做為實(shí)驗(yàn)所需的血標(biāo)本，在-20℃冰箱下儲(chǔ)存。統(tǒng)一把所有血標(biāo)本一次性進(jìn)行DNA提取純化以獲得DNA模板溶液，并用紫外分光光度計(jì)對(duì)其進(jìn)行濃度及純度檢測(cè)，保留符合實(shí)驗(yàn)要求的DNA模板溶液。將DNA模板溶液進(jìn)行白細(xì)胞介素-10(IL-10)啟動(dòng)子目的序列的聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)擴(kuò)增，并把PCR產(chǎn)物進(jìn)行瓊脂糖凝膠電泳及以紫外

3、燈檢測(cè)，保留成功擴(kuò)增出IL-10基因目的DNA片段的PCR產(chǎn)物。將PCR產(chǎn)物送至生物工程公司（生工）廣州測(cè)序部進(jìn)行DNA測(cè)序。對(duì)生工返回的測(cè)序結(jié)果用基因計(jì)數(shù)法直接計(jì)算IL-10基因-582位點(diǎn)等位基因、基因型在濕熱質(zhì)組和平和質(zhì)組的頻數(shù)，并應(yīng)用SPSS19.0軟件采用卡方檢驗(yàn)方法對(duì)比IL-1基因-592位點(diǎn)等位基因頻率、AA基因型（或CA+CC基因型）頻率、CC基因型（或AA+CA基因型）頻率在CKD1期濕熱質(zhì)組與CKD1期平和質(zhì)組間的差