濕熱質(zhì)CKD1期與ICAM-1基因多態(tài)性和血清sICAM-1表達(dá)的相關(guān)性研究.pdf

1、目的:探討濕熱質(zhì)慢性腎臟病1期患者與ICAM-1基因G241R、 K469E位點(diǎn)的多態(tài)性，以及血清sICAM-1表達(dá)的相關(guān)性。分析濕熱體質(zhì)、CKD1期、濕熱質(zhì)CKD1期這三者的ICAM-1基因的基因型差異，以及血清sICAM-1水平的差異，比較不同的基因型對(duì)血清sICAM-1表達(dá)的影響。探討通過(guò)ICAM-1基因多態(tài)性及血清sICAM-1水平檢測(cè)對(duì)于早期慢性腎臟病以及濕熱體質(zhì)的診斷帶來(lái)的臨床意義。
　　方法:
　　1.在腎內(nèi)科

2、住院病房和慢病門診中對(duì)CKD1期患者進(jìn)行中醫(yī)體質(zhì)辨識(shí)，符合納入和排除標(biāo)準(zhǔn)的患者納入，分濕熱質(zhì)CKD1期組、平和質(zhì)CKD1期組。在體檢中心或者健康調(diào)養(yǎng)門診中對(duì)健康人群進(jìn)行中醫(yī)體質(zhì)辨識(shí)，符合納入和排除標(biāo)準(zhǔn)的人群納入，分濕熱質(zhì)健康組、平和質(zhì)健康組。
　　2.納入對(duì)象知情同意后抽取靜脈血。對(duì)每個(gè)全血樣本進(jìn)行基因組DNA提取，用紫外分光光度計(jì)檢測(cè)基因組DNA的純度與濃度，進(jìn)行目的片段PCR擴(kuò)增，瓊脂糖凝膠電泳驗(yàn)證是否為目的片段基因，最后送生

3、物公司進(jìn)行基因堿基測(cè)序，根據(jù)測(cè)序峰圖判斷ICAM-1基因G241R、 K469E位點(diǎn)的基因型。分析四個(gè)組的ICAM-1基因G241R、 K469E位點(diǎn)的基因型及等位基因頻率的差異性，探討該差異性與濕熱質(zhì)CKD1期的相關(guān)性，通過(guò)遺傳平衡定律檢驗(yàn)群體代表性。
　　3.對(duì)血清樣本進(jìn)行ELISA法檢測(cè)sICAM-1濃度。分析四個(gè)組血清sICAM-1濃度差異，探討該差異性與濕熱質(zhì)CKD1期的相關(guān)性，以及該差異性與ICAM-1基因G241R、

4、K469E位點(diǎn)多態(tài)性的相關(guān)性。
　　結(jié)果:
　　1.共納入117例研究對(duì)象，分CKD1期組66例以及健康組51例，CKD1期組包括原發(fā)性腎小球腎炎（52例）、狼瘡性腎炎（8例）、慢性腎盂腎炎（6例）三個(gè)病種，四個(gè)研究組的年齡均數(shù)相等，年齡因素未對(duì)研究造成影響。
　　2.總體研究對(duì)象的ICAM-1基因G241R、 K469E位點(diǎn)的基因型在實(shí)際觀察頻數(shù)與理論頻數(shù)中無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，符合遺傳平衡定律（P＞0.05）。
　　

5、3.在總體研究對(duì)象中，ICAM-1基因G241R位點(diǎn)各基因型頻率分別為GG型0.692、GR型0.308，RR型均未檢測(cè)出，等位基因G、R頻率分別為0.846、0.154;各基因型在四個(gè)研究組中的分布相同，兩個(gè)等位基因在四個(gè)研究組中的分布相同。
　　4.在總體研究對(duì)象中，ICAM-1基因K469E位點(diǎn)各基因型頻率分別為KK型0.59、KE型0.376，EE型0.034，等位基因K、E頻率分別為0.778、0.222;在CKD1期患

6、者中，濕熱質(zhì)患者的KE、 EE基因型頻率較平和質(zhì)患者高（0.455vs0.273、0.121 vs0），而KK基因型頻率則較低（0.424vs0.727），濕熱質(zhì)患者等位基因E頻率較平和質(zhì)患者高（0.348vs0.136），等位基因K頻率較平和質(zhì)患者低（0.652 vs0.864）;在濕熱質(zhì)人群中，CKD1期患者的KE、 EE基因型頻率較健康者高（0.455vs0.32、0.121 vs0），而KK基因型頻率則較低(0.424vs0.6

7、8)，CKD1期患者等位基因E頻率較健康者高（0.348vs0.16），等位基因K頻率較健康者低（0.652vs0.84）。
　　5.四個(gè)研究組間血清sICAM-1濃度總體分布不全相同，濕熱質(zhì)CKD1期組對(duì)比平和質(zhì)CKD1期組血清sICAM-1呈高表達(dá)，濕熱質(zhì)CKD1期組對(duì)比平和質(zhì)健康組血清sICAM-1呈高表達(dá)，濕熱質(zhì)健康組對(duì)比平和質(zhì)CKD1期組血清sICAM-1呈高表達(dá)，濕熱質(zhì)健康組對(duì)比平和質(zhì)健康組血清sICAM-1呈高表達(dá)。

8、
　　6.四個(gè)研究組中，ICAM-1基因G241R位點(diǎn)GG、 GR基因型的血清sICAM-1表達(dá)水平相同;濕熱質(zhì)CKD1期組中，K469E位點(diǎn)ME基因型血清sICAM-1表達(dá)水平較KK基因型高，其余研究組中，KK、 KE基因型的血清sICAM-1表達(dá)水平相同。
　　結(jié)論:
　　1.ICAM-1基因G241R、 K469E位點(diǎn)多態(tài)性分布在實(shí)際觀察頻數(shù)和理論頻數(shù)中未表現(xiàn)出差異性，符合遺傳平衡，本研究的樣本量可代表一個(gè)群體。

9、
　　2.總體研究對(duì)象ICAM-1基因G241R、 K469E兩個(gè)位點(diǎn)的基因型以GG/GR型、KK/KE型為主，等位基因以G、K為主。G241R位點(diǎn)多態(tài)性在四個(gè)研究組的分布相同，未表現(xiàn)出與濕熱質(zhì)、CKD1期的相關(guān)性。K469E位點(diǎn)E等位基因可能是濕熱體質(zhì)、CKD1期的危險(xiǎn)因素，KE/EE基因型者可能表現(xiàn)出對(duì)濕熱、慢性腎臟病的易感性。
　　3.濕熱質(zhì)可能是引起血清sICAM-1高表達(dá)的獨(dú)立危險(xiǎn)因素，而CKD1期未表現(xiàn)出與血清s