萊菔硫烷抑制人小細(xì)胞肺癌NCI-H446細(xì)胞增殖、侵襲以及MMP-9的表達(dá)與活性.pdf

1、目的：
　　 探討萊菔硫烷(sulforaphane，SFN)對(duì)人小細(xì)胞肺癌NCI-H446細(xì)胞增殖侵襲以及基質(zhì)金屬蛋白酶(matrix metalloproteinase，MMP)-9表達(dá)的影響，從而為探索有效的肺癌治療藥物提供參考。
　　 方法：
　　 體外培養(yǎng)NCI-H446細(xì)胞，用0、25、50、100μM SFN處理24～72h后，MTT法檢測(cè)細(xì)胞的增殖和情況和對(duì)纖維連結(jié)蛋白黏附的影響;Transwel

2、l法檢測(cè)SFN處理對(duì)NCI-H446細(xì)胞遷移、侵襲的改變情況。RT-PCR檢測(cè)SFN處理前后MMP-9 mRNA的表達(dá)，并通過(guò)明膠酶譜實(shí)驗(yàn)檢測(cè)MMP-9的酶活性變化。
　　 結(jié)果：
　　 1.MTT結(jié)果顯示，25、50、100μM SFN對(duì)NCI-H446細(xì)胞有明顯抑制作用，生長(zhǎng)抑制率隨SFN作用濃度的升高和作用時(shí)間延長(zhǎng)而升高。其中72h后，25、50、100μM SFN對(duì)NCI-H446細(xì)胞的抑制率分別為11.1％，2

3、5.2％和44.6％。
　　 2.無(wú)SFN的對(duì)照組的細(xì)胞在包被有細(xì)胞外基質(zhì)成分的培養(yǎng)板上能正常生長(zhǎng)，而在經(jīng)SFN處理的各組當(dāng)中，細(xì)胞伸展不完全，當(dāng)SFN濃度達(dá)到100μM時(shí)，細(xì)胞正常形態(tài)已經(jīng)改變，貼壁細(xì)胞極少。經(jīng)MTT法檢測(cè)，不同濃度的SFN均能明顯降低NCI-H446細(xì)胞在細(xì)胞外基質(zhì)的黏附，且隨SFN濃度增大，抑制作用增強(qiáng)。
　　 3.SFN對(duì)NCI-H446細(xì)胞有明顯的侵襲抑制作用，隨SFN劑量的增加侵襲抑制作用明顯

4、增強(qiáng)。25、50、100μM SFN作用24h，NCI-H446穿膜細(xì)胞數(shù)為（85.4±4.41）％、(68.8±6.84)％和(50.5±4.26)％。
　　 4.RT-PCR結(jié)果顯示，不同濃度SFN作用NCI-H446細(xì)胞后，MMP-9的mRNA表達(dá)逐漸降低，呈劑量依賴性。
　　 5.明膠酶譜實(shí)驗(yàn)顯示， SFN處理也能明顯降低NCI-H446細(xì)胞MMP-9的活性。
　　 結(jié)論：
　　 1.SFN能抑制