加熱及其與紫杉醇聯(lián)合對A549和NCI-H446細(xì)胞的作用研究.pdf

1、鄭州大學(xué)碩士學(xué)位論文加熱及其與紫杉醇聯(lián)合對A549和NCIH446細(xì)胞的作用研究姓名：張明五申請學(xué)位級別：碩士專業(yè)：勞動衛(wèi)生與環(huán)境衛(wèi)生學(xué)指導(dǎo)教師：吳逸明王新朝20060601鄭州人學(xué)砸J一學(xué)位論立加熱‘J紫杉醇聯(lián)合對A549和NcIH446糾胞的作用州究胞內(nèi)丙二醛(MaJejcDialdehyde，MDA)水平(具體程序參照試劑盒說明書)。3以0一actin基因?yàn)閰⒄眨\(yùn)用半定量RT—PcR(semi—quantita“veRTPcR)

2、技術(shù)檢測43℃加熱后30min、90min、180min、360min和720min的c_jun和c—fosmRNA的表達(dá)水平；在加熱前3h將含有還原型谷胱苷肽(reducedglutathjone，GsH)濃度為Ommol／L、lmmol幾和5mmol／L的培養(yǎng)液加入培養(yǎng)瓶中，運(yùn)用半定量RT—PcR技術(shù)檢測加熱后180min的JNKl／2(cjunNH2te咖inalkinase)mRNA表達(dá)水平；收集同樣因素處理后360瑚in的細(xì)胞

3、樣品，運(yùn)用流式細(xì)胞術(shù)檢測細(xì)胞凋亡率。4加熱與紫杉醇聯(lián)合對A549細(xì)胞和NcI—H446細(xì)胞的作用A549細(xì)胞的紫杉醇作用濃度為625、125、25、50、100和200ng向】；NcI—H446細(xì)胞的紫杉醇作用濃度為25、50、loo、200、400和800ng／ml41運(yùn)用MTT比色法檢測不同的溫度(37℃、39℃、4l℃、4澎和45℃)加熱40min以及43℃加熱不同時間(40min、80min、120min)與紫杉酵聯(lián)合對A549

4、細(xì)胞和NCI—H446的細(xì)胞的增殖抑制率；42采用半定量RT—PcR技術(shù)檢測43℃加熱40min與紫杉醇聯(lián)合對A549細(xì)胞和NCI—H446細(xì)胞血管內(nèi)皮生長因子(vascularendothclialg“)叭hfactor，vEGF)mRNA表達(dá)的影響；結(jié)果1A549細(xì)胞實(shí)驗(yàn)結(jié)果1143℃加熱40min對A549細(xì)胞作用的結(jié)果加熱組與非加熱組細(xì)胞內(nèi)RoS的水平分別為103O04和140O10(只O05)：加熱組與非加熱組細(xì)胞內(nèi)MDA的水

5、平分別為025O08和030O12(尸005)；c—jun和c—fosmRNA的表達(dá)水平分別在加熱后30min達(dá)到最低值(006O04)和最高值(1_34O46)，與加熱前比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(尺O01)；在不同濃度(O腳01／L、1舯01／L、5mmol／L)GsH作用下，加熱組和非加熱組JNKlmRNA表達(dá)水平分別為O06O05和009008(DO05)、017O06和01lO03(PO05)、016O10和O020Ol(乃O05