石蒜堿抑制肺癌NCI-H460細(xì)胞增殖及Lewis肺癌小鼠腫瘤生長作用研究.pdf

1、目的：
　　通過研究石蒜堿在體外對人肺癌NCI-H460細(xì)胞增殖的抑制作用及對NCI-H460細(xì)胞凋亡的影響，和體內(nèi)對Lewis肺癌小鼠的抑瘤作用，探討石蒜堿抗腫瘤機(jī)制，旨在為臨床非小細(xì)胞肺癌的治療尋找新的高效、低毒的化療藥物。
　　方法：
　　1.石蒜堿對NCI-H460的細(xì)胞毒作用：
　?。?）MTT法檢測石蒜堿抑制NCI-H460細(xì)胞增殖的作用；
　?。?）用流式細(xì)胞儀檢測NCI-H460細(xì)胞的凋亡率

2、；
　?。?）比色法檢測凋亡相關(guān)因子Caspase3的活性。
　　2.石蒜堿對Lewis肺癌小鼠的抑瘤作用：
　　（1）Lewis肺癌細(xì)胞株的培養(yǎng)；
　　（2）小鼠Lewis肺癌移植瘤模型的建立；
　?。?）處死小鼠，計算抑瘤率，脾臟指數(shù)及胸腺指數(shù)；
　?。?）HE染色后觀察細(xì)胞形態(tài)。
　　結(jié)果：
　　1.石蒜堿作用NCI-H460細(xì)胞24 h后，顯微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài)，經(jīng)石蒜堿作用后，NC

3、I-H460細(xì)胞外形不規(guī)則，細(xì)胞皺縮，大小不一，細(xì)胞破碎程度隨給藥劑量增加而增大，細(xì)胞數(shù)量逐漸減少。
　　2.用石蒜堿處理NCI-H460細(xì)胞24 h后，NCI-H460細(xì)胞增殖受到明顯的抑制，與對照組相比差異顯著(P＜0.05，P＜0.01)，并呈現(xiàn)一定的濃度相關(guān)性。IC50為5.79±0.11μmol/L，表明石蒜堿能夠有效抑制肺癌NCI-H460細(xì)胞增殖。
　　3.隨著石蒜堿處理濃度的升高，處理組細(xì)胞凋亡率逐漸升高，與

4、生理鹽水組相比差異顯著(P＜0.01)。最高濃度16μmol/L時，凋亡率達(dá)到46.2±3.46％。上述結(jié)果表明石蒜堿對NCI-H460細(xì)胞的凋亡具有誘導(dǎo)效應(yīng)，并呈現(xiàn)一定的劑量依賴性。
　　4.隨著石蒜堿濃度的增加，Caspase3的活性逐漸增高。石蒜堿處理組與生理鹽水對照組比較，Caspase3的活性顯著升高(P＜0.01)。結(jié)果表明石蒜堿可增強(qiáng)肺癌NCI-H460細(xì)胞的Caspase3的活性，從而誘導(dǎo)NCI-H460細(xì)胞凋亡。

5、
　　5.與生理鹽水組比較，石蒜堿低、中低、中、中高、高劑量組對Lewis肺癌小鼠腫瘤生長均有抑制作用，其中以高劑量組(40 mg/kg)的作用最為顯著，抑瘤率56.8%( P＜0.01)。
　　6.荷瘤小鼠實(shí)體瘤組織的HE染色實(shí)驗結(jié)果顯示生理鹽水組腫瘤細(xì)胞生長均勻緊密，核固縮較少，無壞死或點(diǎn)狀壞死；石蒜堿各劑量組及環(huán)磷酰胺組腫瘤細(xì)胞可見大量核固縮，核碎裂，腫瘤細(xì)胞數(shù)量減少，排列疏松，尤其以高劑量組(40 mg/kg)的作用