抗HIV-1化合物組合為候選殺微生物劑體外研究.pdf

1、通過性途徑獲得的人類免疫缺陷病毒(Human Immunodeficiency Virus，HIV)感染逐年增加，2012年中國84.9％的HIV新增感染病例是通過性接觸傳播的[1]，UNAIDS宣布減少50％HIV性傳播是2015年艾滋病防控的十大目標之一[2]。在積極研發(fā)有效的HIV疫苗的同時，其他生物預防策略如殺微生物劑阻斷性途徑HIV感染也成為當前生物預防技術領域的研究熱點之一。殺微生物劑是具有抗病毒活性的物質，包括化學合成小分

2、子、生物合成大分子、天然植物礦物及其提取物等，通過在陰道或直腸內給藥來控制性傳播感染性疾病包括HIV的感染。2010年發(fā)表的CAPRISA004臨床試驗結果表明，含1％替諾福韋(Tenofovir, TFV)—一種逆轉錄酶抑制劑——的陰道凝膠能夠減少39％的女性感染HIV-1[3]。該結果極大地激勵了新型更有效的殺微生物劑的研發(fā)進程。不同作用機制的多種抗病毒藥物聯(lián)合使用不僅能夠產(chǎn)生協(xié)同抗HIV-1效應，還可降低單個藥物的使用劑量，減少毒

3、性，降低單一藥物使用易發(fā)的耐藥等副作用。因此，本研究主要在體外細胞系模型開展不同作用機制的抗病毒藥物聯(lián)合阻斷HIV進入宿主細胞、并抑制病毒在宿主細胞內的復制的效果的研究，為新型殺微生物劑的研發(fā)提供有效候選。
　　本研究采用的體外評價體系是基于TZM-bl細胞模型。TZM-bl細胞屬HeLa細胞系，表面共表達HIV-1受體分子CD4及輔助受體分子(Co-receptor) CC趨化因子受體5(CC chemokine recepto

4、r5，CCR5)、CXC趨化因子受體4(CXCchemokine receptor4，CXCR4)，并攜帶熒光素酶表達基因，HIV-1感染細胞時HIV的Tat蛋白可激活熒光素酶表達，TZM-bl細胞系已是一種成熟的體外篩選抗HIV藥物平臺。
　　本研究首先評價了中藥提取物ScirpusinA和B抗病毒效果，發(fā)現(xiàn)兩種候選藥物可有效抑制HIV假病毒的單一周期感染，還能抑制實驗室適應株HIV-1ⅢB的感染(EC50(Scirpusin

5、B)=1.33μM; EC50(Scirpusin A)=4.77μM)，提示Scirpusin B的抗病毒作用優(yōu)于Scirpusin A，具體機制尚待深入研究。
　　同時，本研究還評價了2種不同作用機制的化合物（HIV核衣殼蛋白抑制劑SAMT10和膜融合抑制劑西夫韋肽）對HIV-1病毒的聯(lián)合抑制效果。發(fā)現(xiàn)這兩種不同作用機制的藥物聯(lián)合使用，在抑制HIV-1假病毒感染時，相對于單獨使用SAMT10或SFT， EC50分別提升了5-6

6、倍(SAMT0:6.23μMvs.1.06μM; SFT:3.52nM vs.0.71nM)。在抑制HIV-1ⅢB病毒感染時，相對于單獨使用SAMT10或SFT，EC50分別提升了3.44倍(SAMT10)和2.34倍(SFT)。而且，當SMAT10與SFT進行定摩爾率組合應用時，相比單獨用藥，聯(lián)合用藥EC50降低，CI值＜1，說明SAMT10與SFT聯(lián)合使用能夠產(chǎn)生良好的協(xié)同作用。
　　本研究結果為新型殺微生物劑研發(fā)提供了良好的