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文檔簡介
1、本論文對遠志皂苷堿水解產(chǎn)物的制備工藝,質(zhì)量分析方法及神經(jīng)細胞保護的體外活性進行了研究,為遠志皂苷堿水解產(chǎn)物開發(fā)抗老年性癡呆的藥物提供了科學依據(jù)。
以pH值、溫度和時間作為考察因素,細葉遠志皂苷作為考察指標,采用TLC和HPLC作為檢測方法,對遠志皂苷堿水解的參數(shù)進行了研究,結果表明pH=14,溫度100℃,水解4h為最佳水解參數(shù)。堿水解溶液以大孔樹脂柱層吸,先以蒸餾水洗脫除去雜質(zhì),再以95%乙醇洗脫,即得遠志皂苷堿水解產(chǎn)物
2、。
通過各種色譜技術從遠志皂苷堿水解產(chǎn)物中分離得到5個單體化合物,綜合利用其理化性質(zhì)和波譜特征(ESI-MS、1H-NMR和13C-NMR)鑒定出這些化合物的結構,分別為細葉遠志皂苷(tenuifolin)、黃花倒水連皂苷A(fallaxsaponin A)、3,4,5-三甲氧基肉桂酸(3,4,5-trimethoxycinnamic acid,TMCA)、對甲氧基肉桂酸(p-methoxycinnamic acid,PM
3、CA)和肉桂酸(cinnamic acid,CA)。
以tenuifolin、fallaxsaponin、TMCA和PMCA為對照品,采用HPLC法,通過線性范圍、精密度、重復性、穩(wěn)定性和加樣回收率等方法學考察,對三批遠志皂苷堿水解產(chǎn)物的含量進行了測定,結果為tenuifolin14.9%,fallaxsaponin19.7%,TMCA24.7%,PMCA7.7%.
采用SH-SYSY和PC12細胞株,通過H
4、2O2、Aβ25-35、皮質(zhì)酮和谷氨酸4個損傷模型,對遠志皂苷堿水解產(chǎn)物、遠志總皂苷、遠志寡糖酯、tenuifolin、fallaxsaponin、TMCA、PMCA和CA共8個樣品進行了體外活性篩選。結果表明:
對于正常SH-SY5Y和PC12細胞株,遠志總皂苷、遠志皂苷堿水解產(chǎn)物、tenuifolin和fallaxsaponin表現(xiàn)出促進細胞增殖的作用;
對H2O2損傷的SH-SY5Y細胞株,遠志總皂苷、
5、遠志皂苷堿水解產(chǎn)物、tenuifolin和fallaxsaponin對細胞具有保護作用;
對Aβ25-35損傷的PC12細胞株,遠志總皂苷和遠志皂苷堿水解產(chǎn)物對細胞具有保護作用;
對皮質(zhì)酮損傷的PC12細胞株,遠志總皂苷和遠志寡糖酯對細胞具有保護作用;
對谷氨酸損傷的PC12細胞株,遠志總皂苷、遠志皂苷堿水解產(chǎn)物、tenuifolin和fallaxsaponin對細胞具有保護作用。
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