小麥低聚肽對大鼠氮代謝、胃腸道保護作用的影響及機制研究.pdf

1、小麥活性肽是植物源食物活性肽，已有的研究顯示小麥活性肽具有豐富的生物學功能，如抗氧化、抑制血管緊張素轉(zhuǎn)化酶活性、阿片活性、免疫調(diào)節(jié)等，然而體內(nèi)試驗的研究較少，所以本文擬探討小麥低聚肽對大鼠氮代謝和胃腸保護作用的影響以及作用機制。研究主要包括以下四個部分:
　　第一部分:小麥低聚肽對大鼠氮代謝以及胃腸黏膜結(jié)構(gòu)和功能的影響
　　目的:觀察灌胃小麥低聚肽對于大鼠氮代謝、胃腸道上皮細胞形態(tài)和胃腸道關(guān)鍵消化酶活性的影響。
　　方

2、法:SD大鼠50只，隨機分為空白組，低、中、高劑量小麥低聚肽組和小麥蛋白組，每天灌胃1次。分別于第10、20、30d用代謝籠采集大鼠24h糞、尿樣品。連續(xù)灌胃30d，處死所有大鼠，取血清、胃和小腸黏膜，觀察氮代謝指標、血清生化指標、胃腸內(nèi)表面掃描電鏡、胃腸道消化酶活等的變化。
　　結(jié)果:灌胃30d后，低劑量小麥低聚肽能顯著提高大鼠蛋白質(zhì)表觀消化率、氮沉積、凈蛋白質(zhì)利用率;低、中劑量小麥低聚肽均能顯著增加蛋白質(zhì)生物學價值。低、中、高

3、劑量小麥低聚肽均能顯著增加大鼠血清總蛋白含量。低、中劑量小麥低聚肽組大鼠胃腸道上皮細胞較空白對照組飽滿、連接緊密，排列整齊有序。低、中劑量小麥低聚肽均能顯著上調(diào)大鼠胃蛋白酶的活力;低、中、高劑量小麥低聚肽均能顯著上調(diào)大鼠小腸黏膜氨基肽酶活力;中、高劑量小麥低聚肽均能上調(diào)大鼠小腸黏膜Na+-K+-ATP酶活力。
　　結(jié)論:一定劑量的小麥低聚肽能提高大鼠對于蛋白質(zhì)的吸收與利用，其可能的途徑是:(1)促進胃腸道上皮細胞的生長;(2)胃蛋

4、白酶、小腸黏膜氨基肽酶、Na+-K+-ATP酶活力的上調(diào)。
　　第二部分:小麥低聚肽對非甾體類藥物致大鼠腸損傷的保護作用
　　目的:通過非甾體類藥物誘導的小腸損傷和氧化應(yīng)激動物模型，來觀察小麥低聚肽對小腸可能的保護作用。
　　方法:不同劑量的小麥低聚肽和小麥蛋白灌胃大鼠30d。大鼠處死前，用非甾體類藥物灌胃損傷大鼠小腸2次。取大鼠血清和小腸黏膜組織，觀察血清細胞因子、小腸病理切片、小腸黏膜抗氧化酶和阿片受體mRNA表達

5、的變化。
　　結(jié)果:小麥低聚肽可以減少小腸水腫和損傷，顯著降低了血清中TNF-α含量。非甾體類藥物可以顯著增加小腸黏膜的氧化應(yīng)激水平，小麥低聚肽有一定的抗氧化功效。同時小麥低聚肽能上調(diào)小腸黏膜中GSH-Px的活力。另外小麥低聚肽可以顯著下調(diào)mu-阿片受體mRNA的表達。
　　結(jié)論:非甾體類藥物可以誘導大鼠小腸損傷的模型，小麥低聚肽可能是一個可以有效減少大鼠腸損傷和抗氧化的工具。
　　第三部分:小麥低聚肽對非甾體類藥物致

6、大鼠胃損傷的保護作用
　　目的:通過非甾體類藥物誘導的胃損傷和氧化應(yīng)激動物模型，來觀察小麥低聚肽可能的保護作用。
　　方法:動物分組同第二部分。取大鼠胃體的相同部位，觀察胃體病理切片、胃體組織中抗氧化酶活、iNOS活力、NO含量和阿片受體、iNOS mRNA表達的變化。
　　結(jié)果:小麥低聚肽可以減少大鼠胃體上皮細胞變性和損傷，顯著降低了胃體的組織中氧化應(yīng)激水平和NO含量，小麥低聚肽有一定的抗氧化功效。同時小麥低聚肽能顯

7、著上調(diào)胃體的組織中SOD和GSH-Px的活力，下調(diào)iNOS的活力。另外小麥低聚肽可以顯著下調(diào)mu-阿片受體mRNA的表達。
　　結(jié)論:非甾體類藥物可以誘導大鼠胃損傷的模型，小麥低聚肽可能是一種有效減少大鼠胃損傷和抗氧化的活性物質(zhì)。保護途徑與其能上調(diào)抗氧化應(yīng)激酶活力，抑制胃體的組織中NO的生成，下調(diào)mu-阿片受體mRNA的表達有關(guān)。
　　第四部分:小麥低聚肽對吲哚美辛致IEC-6細胞系損傷的保護作用及分子機制
　　目的:

8、前期研究顯示小麥低聚肽可以減少非甾體類藥物對小腸上皮細胞的損傷，但是分子機制并不清楚。本研究利用吲哚美辛誘導腸上皮細胞氧化應(yīng)激損傷的模型，觀察小麥低聚肽對IEC-6細胞系ERK, NF-κB信號通路的影響。
　　方法:(0，125，500和2000 mg/L)小麥低聚肽預處理IEC-6細胞系24h，90 mg/L吲哚美辛損傷12h后，裂解細胞。觀察IEC-6細胞系抗氧化酶活力，MDA含量，p-ERK1/2、NF-κB p65的蛋白

9、表達，COX、iNOS活力，PGE-2、NO含量的變化。
　　結(jié)果:小麥低聚肽可以顯著上調(diào)IEC-6細胞系SOD和GSH-Px活力。2000 mg/L小麥低聚肽可以顯著抑制IEC-6細胞系p-ERK1/2、NF-κBp65的表達。小麥低聚肽預處理最終可以顯著減少IEC-6細胞中MDA、NO的含量，增加腸上皮細胞PGE-2的合成。
　　結(jié)論:小麥低聚肽對于吲哚美辛誘導IEC-6細胞系損傷的保護作用的分子機制可能與其抑制胞內(nèi)ER