靶向腫瘤細(xì)胞的腺病毒纖毛蛋白改造研究.pdf

1、浙江理工大學(xué)碩士學(xué)位論文靶向腫瘤細(xì)胞的腺病毒纖毛蛋白改造研究姓名：陳亞龍申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專業(yè)：生物化學(xué)與分子生物學(xué)指導(dǎo)教師：錢其軍20100301浙江理工大學(xué)碩士學(xué)位論文合，進(jìn)而屏蔽掉細(xì)胞表面的受體，使釋放出的子代病毒不能有效感染周圍的腫瘤細(xì)胞，阻斷病毒對(duì)腫瘤細(xì)胞的二次感染。( 范小龍教授文章i np r e s s ) ，本課題通過W e s t e r nB l o t 及R T - P C R 基本證實(shí)了這一論點(diǎn)，基于以上論點(diǎn)，

2、本課題擬從F i b e r 入手，對(duì)腺病毒的纖毛蛋白進(jìn)行修飾，然而傳統(tǒng)的腺病毒改造方法較為繁瑣且難以操作，故本研究中我們建立了成熟的G a t e w a y 重組系統(tǒng)，使腺病毒的f i b e r 改造變得更易于操作，并且f i b e r 后插入的紅色熒光蛋白在熒光顯微鏡下觀察成功變紅，說明我們建立的G a t e w a y 重組系統(tǒng)是成功的。本研究中為增加腺病毒的二次感染率，我們?cè)谙俨《镜膄 i b e r 后面加上M i c

3、 r o R N A 2 1 ，M i c r o R N A l 5 5 腫瘤特異性靶位點(diǎn)以下調(diào)f i b e r 的表達(dá)，并利用G a t e w a y 克隆技術(shù)將進(jìn)行修飾過的F i b e r 直接重組到含有去除野生型f i b e r 的全長(zhǎng)腺病毒的載體中，將該載體包裝的病毒直接轉(zhuǎn)染2 9 3 細(xì)胞和其它肝癌細(xì)胞，希望可以篩選出對(duì)腫瘤細(xì)胞具有高親和力和高殺傷能力的腺病毒載體。目前己成功構(gòu)建了一系列的f i b e r 后帶M