γ射線對結(jié)合珠蛋白基因表達(dá)的誘導(dǎo)作用及功能初步研究.pdf

1、急性放射損傷的受照劑量早期判斷對于急性放射損傷的治療有著重要作用。為了尋找急性放射損傷的早期診斷指標(biāo)，運(yùn)用二維電泳篩選8Gyγ射線全身照射后小鼠血清中差異表達(dá)蛋白，并利用質(zhì)譜技術(shù)對差異表達(dá)蛋白進(jìn)行鑒定。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，8Gyγ射線全身照射后小鼠血清中結(jié)合珠蛋白(Hp)水平較正常對照小鼠出現(xiàn)了明顯的增加。隨后，研究了電離輻射對Hp的誘導(dǎo)表達(dá)及增加的Hp在電離輻射損傷中的功能，得到了以下幾個(gè)方面的結(jié)果： 1．小鼠受到全身γ射線照射后，血清

2、中Hp變化規(guī)律的研究。小鼠受到1～12Gyr射線全身照射后收集血清，利用WbstemB10t分析血清中Hp的變化。結(jié)果顯示，照射后血清中Hp水平較正常對照出現(xiàn)了明顯增加，而且隨著照射劑量的增加和照射后時(shí)間的延長，這種增加逐漸明顯。提示，血清中的Hp蛋白水平可能成為急性放射損傷早期診斷指標(biāo)。 2．小鼠受到全身γ射線照射后，造血免疫器官中Hp基因mRNAA水平變化研究。PT-PCR結(jié)果顯示，照射后小鼠骨髓、胸腺、脾臟、肝臟、肺和小腸

3、中Hp基因mRNA水平均較正常對照小鼠出現(xiàn)了明顯的增加。 3．γ射線對THP-1．1細(xì)胞系中Hp的誘導(dǎo)表達(dá)作用及機(jī)制研究。利用單核白血病來源的細(xì)胞株THP-1細(xì)胞研究發(fā)現(xiàn)，γ射線能夠誘導(dǎo)THP-1細(xì)胞中Hp基因mRNA和蛋白的表達(dá)，同時(shí)利用EMSA和抗體阻滯實(shí)驗(yàn)分析了參與γ射線誘導(dǎo)Hp表達(dá)的順式作用元件和反式作用因子。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，Hp基因的啟動(dòng)子區(qū)域中B和C區(qū)域?qū)﹄婋x輻射誘導(dǎo)Hp的表達(dá)起著重要的作用，轉(zhuǎn)錄因子STAT3和C／EBP

4、B-LIP參與了電離輻射誘導(dǎo)Hp表達(dá)的過程。 4．Hp在γ射線照射誘導(dǎo)細(xì)胞損傷中的功能研究。利用流式細(xì)胞術(shù)結(jié)合細(xì)胞免疫分析發(fā)現(xiàn)，小鼠外周血和骨髓有核細(xì)胞中只有部分細(xì)胞含有Hp，Hp陽性細(xì)胞的比例在照射后出現(xiàn)了明顯的增加。骨髓細(xì)胞中，Hp陽性細(xì)胞對丫射線具有較強(qiáng)的抵抗性，轉(zhuǎn)染Hp基因的COS一7細(xì)胞，對γ射線誘導(dǎo)的細(xì)胞凋亡亦具有較強(qiáng)的抵抗性。 本研究的創(chuàng)新性及結(jié)論：本研究將蛋白質(zhì)組技術(shù)引入到放射醫(yī)學(xué)領(lǐng)域，分析了全身丫射線照