妊娠期糖尿病的相關(guān)因素研究.pdf

1、娠期糖尿病(GDM)是妊娠期常見的并發(fā)癥之一，可使孕產(chǎn)婦、胎兒產(chǎn)生羊水過多、妊娠期高血壓疾病、巨大兒或胎兒生長受限、胎兒宮內(nèi)缺氧甚至死胎等，新生兒易發(fā)生呼吸窘迫綜合征、低血糖_、低鈣血癥、低鎂血癥、紅細胞增多癥及高膽紅素血癥等嚴重的并發(fā)癥，并且其子代將來患糖耐量降低，兒童期肥胖、神經(jīng)心理失調(diào)等風險性也增加，雖然GDM孕婦多數(shù)產(chǎn)后糖代謝異常能恢復正常，但將來發(fā)生糖尿病(DM)的危險性明顯增加。GDM近年來發(fā)生率逐年上升，約占全部妊娠的7％

2、，由于種族、確診方法及標準的不同，其發(fā)病率為1％～14％。據(jù)報道，中國目前GDM發(fā)生率為1.31％-3.75％。其持續(xù)增長的流行病學趨勢已構(gòu)成嚴重的公共衛(wèi)生問題，在國內(nèi)外產(chǎn)科界正受到越來越多的關(guān)注。 GDM的病因及發(fā)病機制目前尚不明確，多數(shù)學者認為是遺傳和環(huán)境兩大因素的結(jié)果。本課題將從流行病學、基因等方面對其發(fā)病進行探討。 目的：(1)揭示本地區(qū)GDM發(fā)病的相關(guān)因素，包括危險因素和保護因素，為該病的病因研究提供線索，為該

3、病的預(yù)防控制提供依據(jù)。(2)測定本地區(qū)人群GDM的易感基因和保護基因，為探索發(fā)病機制，制定合理的預(yù)防、治療方案尋找依據(jù)。(3)通過測定胎盤部位APNmRNA和AdipoR1/2mRNA的相對表達量在GDM病理狀態(tài)下的變化趨勢，分析其與新生兒體重、新生兒PI之間的關(guān)系。(4)檢測GDM患者血硒及胎盤硒水平變化，探討妊娠婦女血硒及胎盤硒水平變化與GDM對患者胎盤組織形態(tài)學改變的作用。 方法：(1)相關(guān)因素調(diào)查，采用病例對照1:2配比

4、設(shè)計，選擇2005年8月至2007年12月在山西醫(yī)科大學第一附屬醫(yī)院住院分娩的山西籍孕婦經(jīng)篩查符合GDM診斷標準者為病例組，在同期篩查中選擇非GDM孕婦作為對照組。配比條件：年齡±2歲、籍貫均為山西籍且本地居住20年以上。依據(jù)α=0.05,β=0.1，估計平均OR值3.0，對照組因素暴露比例0.2，估計樣本量：病例組72人，對照組144人，采用單因素及多因素條件logistic回歸計算OR值及95％可信區(qū)間。(2)用EDTA抗凝方法收集

5、39例GDM組和42例對照組的靜脈血，用飽和酚-氯仿方法提取基因組DNA，以順序特異引物聚合酶鏈反應(yīng)技術(shù)(polymerisechainreaction-sequencespecificprimers，PCR-SSP)擴增部分HLA-DR、DQ、DA部分等位基因，依據(jù)實驗室工作實際及統(tǒng)計分析要求，隨機選取病例及對照組各送30例測序。利用SPSS統(tǒng)計軟件，采用X2檢驗比較兩組間的基因頻率差別，P＜0.05認為有統(tǒng)計學意義。(3)收集26例

6、GDM組和30例對照組的胎盤組織，-70℃保存。采用逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(yīng)(reversetranscriptionPCRRT--PCR)技術(shù)，檢測30例正常妊娠及26例GDM兩組胎盤APNmRNA和AdipoR1/2mRNA的表達，對其進行半定量分析，研究APNmRNA和AdipoR1/2mRNA在GDM病理狀態(tài)下表達水平的改變，利用SPSS統(tǒng)計軟件，數(shù)據(jù)用均數(shù)標士準差表示，采用t檢驗，P＜0.05認為有統(tǒng)計學意義。(4)30例GDM組

7、和30例對照組妊娠婦女，于產(chǎn)前采集空腹靜脈血，分娩時收集胎盤組織，采用2，3-二氨基奈(DAN)熒光法及5，5-二硫代雙(二硝基苯甲酸)直接法，分別檢測血硒和胎盤硒水平及全血谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)的活性，并對GDM組及對照組各10例胎盤組織進行病理學觀察。利用SPSS統(tǒng)計軟件，數(shù)據(jù)用均數(shù)標±準差表示，采用t檢驗，P＜0.05認為有統(tǒng)計學意義。 結(jié)果：(1)DM家族史(OR=3.006;95％CI1.672～5.401

8、)、孕前體重指數(shù)(OR=2.549；95％CI1.420～4.579)、孕期增重過多(OR=1.853；95％CI1.044～3.292)、巨大兒生育史(OR=2.997：95％CI1.175～7.639)、孕期運動(OR=0.447；95％CI0.251～0.797)、平衡飲食(OR=0.538：95％CI0.290～0.998)等因素是GDM的獨立影響因素，其中有意識適當?shù)捏w育鍛煉、平衡飲食為保護因素，其他均為危險因素。最終進入主效

9、應(yīng)模型的因素是：DM家族史(OR=2.997；95％CI1.175～7.639)、孕前體重指數(shù)(OR=2.939；95％CI1.193～7.241)、孕期增重過多(OR=1.841；95％CI1.143～2.966)、孕期運動(OR=0.393；95％CI0.220～0.703)。(2)A:HLA-II類基因頻率在兩組間有差異，與以往報道一致；B：GDM組中，HLA-DRB1*0301(X2=4.855；P=0.028)、DQB1802

10、01(X2=4.667:P=0.031)基因頻率顯著高于對照組(38.5％vs16.7％；28.2％vs9.5％，P＜0.05)，差異有統(tǒng)計學意義；GDM組中，HLA-DQA1*0103基因頻率顯著低于對照組(7.7％vs14.3％，P＜0.05)，差異有統(tǒng)計學意義。(X2=6.740；P=0.009)；而GDM組中DQA1*0501基因頻率高于對照組，但兩者相比差異無統(tǒng)計學意義(X2=0.509；P=0.476)。(3)A:APNmR

11、NA和AdipoR1/2mRNA表達于胎盤組織；B:GDM組新生兒的出生體重(t=4.667:P=0.031)、新生兒PI(t=4.667:P=0.031)，均高于對照組，有統(tǒng)計學意義；C:GDM組APNmRNA的表達水平顯著低于對照組(0.7565±0.19vs1.1653±0.17，P＜0.05)差異有顯著的統(tǒng)計學意義；GDM組AdipoR1mRNA的表達水平與對照組差異無顯著的統(tǒng)計學意義(2.0789±0.67vs1.9843±0

12、.68，P＞0.05)；GDM組AdipoR2mRNA的表達水平與對照組差異具有顯著的統(tǒng)計學意義(1.5788±0.36vs0.1883±0.25，P＜0.001)：D:GDM組胎盤APNmRNA的表達水平與新生兒出生體重(r=0.959，P＜0.001)、PI(r=-0.477，P＜0.001)呈負相關(guān)，對照組胎盤APNmRNA的表達水平與其新生兒出生體重(r=-0.775，P＜0.001)、PI(r=-0.662，P＜0.001)呈

13、負相關(guān)。兩組合并后，胎盤APNmRNA的表達水平與新生兒出生體重(r=-0.915，P＜0.001)、PI(r=-0.641，P＜0.001)均呈負相關(guān)。兩組AdipoR2mRNA的表達水平與新生兒出生體重(分別為：r=-0.276，r=-0.281，P均＞0.05)、PI(分別為：r=-0.143，r=-0.155，P均＞0.05)無明顯相關(guān)性。(4)A：GDM組孕婦血硒、胎盤硒及血GSH-PX活性分別為(0.0620±0.0224m

14、g/L)、(0.4854±0.0857mg/L)、(68.20±15.91)活力單位明顯低于對照組(0.0783±0.0209mg/L)、(0.5473±0.0842mg/L)、(80.36±12.68)活力單位，差異有顯著統(tǒng)計學意義(P＜0.01)。B：孕婦血硒水平與GSH-PX活性呈顯著正相關(guān)(r=0.714，P＜0.001)。C:GDM組孕婦血硒與胎盤硒含量成顯著正相關(guān)(r=0.639，P＜0.001)，對照組血硒與胎盤硒水平無明

15、顯相關(guān)。D：光鏡下觀察GDM組胎盤的病理改變主要為：絨毛水腫，干絨毛小動脈管壁增厚，管腔狹窄，合體細胞結(jié)節(jié)增多，細胞滋養(yǎng)葉細胞及血管合體膜形成增加；對照組未見明顯上述病理改變。 結(jié)論：(1)DM家族史、孕前體重指數(shù)、孕期增重過多、巨大兒生育史、孕期運動、平衡飲食等因素是GDM的獨立影響因素，其中有意識適當?shù)捏w育鍛煉、平衡飲食為保護因素，其他均為危險因素。(2)HLA-DRB1*0301、DQB1*0201基因可能為該地區(qū)GDM的

16、易感基因：而HLA-DRA1*0103基因可能為此地區(qū)人群的保護基因。(3)A：胎盤組織中存在APNmRNA和AdipoR1/2mRNA的表達；B:GDM組胎盤組織APNmRNA表達水平低于對照組，提示胎盤組織APNmRNA的表達同樣受到GDM病理狀態(tài)的影響，在GDM時AdipoR1mRNA的表達水平無明顯改變，而AdipoR2mRNA表達水平顯著高于對照組，提示在胎盤局部APN可能主要通過AdipoR2發(fā)揮生物學效應(yīng)。C:APNmRN

17、A的表達水平與新生兒體重與PI呈負相關(guān)性；AdipoR2mRNA的表達水平與新生兒體重與PI無明顯相關(guān)性。胎盤部位APN及AdipoR與母嬰代謝之間的關(guān)系有待進一步探討；(4)A：血及胎盤組織中硒的缺乏及GSH-Px活性的下降可能與GDM的發(fā)生有關(guān)；B：硒是抗氧化物酶.谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)的活性成分,GDM患者胎盤硒水平降低，可導致胎盤GSH-Px活性下降，發(fā)生脂質(zhì)過氧化反應(yīng)，破壞胎盤生物膜結(jié)構(gòu)，可能與GDM患者胎盤組織病