雙氫青蒿素調(diào)控VEGF-VEGFR信號(hào)通路介導(dǎo)的抗肝細(xì)胞癌效應(yīng)研究.pdf

1、目的:通過研究不同劑量組雙氫青蒿素對(duì)人肝癌SMMC-7721移植瘤裸鼠模型的體內(nèi)抑瘤作用，以及雙氫青蒿素對(duì)離體培養(yǎng)的SMMC-7721細(xì)胞體外抑制作用，探討雙氫青蒿素的抗肝癌作用和作用機(jī)制。
　　方法:體內(nèi)實(shí)驗(yàn):人肝癌SMMC-7721細(xì)胞離體培養(yǎng)，建立人肝癌SMMC-7721移植瘤裸鼠模型，分雙氫青蒿素低(20mg/kg)、中(30mg/kg)、高(40mg/kg)劑量組、陽性對(duì)照組（貝伐單抗100mg/kg）和空白對(duì)照組;雙氫

2、青蒿素各組給予相應(yīng)濃度雙氫青蒿素灌胃，陽性對(duì)照組給予貝伐單抗溶液腹腔注射，空白對(duì)照組給予相同體積生理鹽水灌胃;給藥后每3d測量各組裸鼠移植瘤體積，繪制腫瘤生長曲線;滿28d處死各組裸鼠，剝離腫瘤稱重，計(jì)算抑瘤率;收集移植瘤標(biāo)本，HE染色法檢測腫瘤病理改變。體外實(shí)驗(yàn):配置低(20mg/kg)、中(30mg/kg)、高(40mg/kg)、極高(60mg/kg)組雙氫青蒿素含藥血清，取指數(shù)生長期的人肝癌SMMC-7721細(xì)胞分成雙氫青蒿素低、

3、中、高、極高組，陽性對(duì)照組（貝伐單抗10mg/L），空白對(duì)照組;藥物處理后倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài)變化;噻唑藍(lán)法檢測各組細(xì)胞增殖;流式細(xì)胞儀檢測各組細(xì)胞凋亡;RT-PCR法和western-blotting法檢測各組細(xì)胞VEGF、VEGFR-1的核酸和蛋白表達(dá)。
　　結(jié)果:體內(nèi)實(shí)驗(yàn):相對(duì)于空白對(duì)照組，雙氫青蒿素能明顯延緩腫瘤生長速度，雙氫青蒿素低、中、高組的抑瘤率分別達(dá)到42％、53％、48％，中劑量組的雙氫青蒿素抑瘤效果較低、高

4、劑量組明顯，HE染色各組無明顯變化;體內(nèi)實(shí)驗(yàn):雙氫青蒿素各劑量組均能抑制細(xì)胞增殖，并且呈現(xiàn)時(shí)間和濃度的依賴性，其中中劑量組的抑制率最高，24、48、72h的細(xì)胞抑制率分別達(dá)到36.21％、41.56％和45.88％;流式細(xì)胞儀檢測結(jié)果顯示，雙氫青蒿素低、中、高、極高劑量組的細(xì)胞凋亡率分別為4.74％、19.73％、17.42％、16.13％，中劑量組的細(xì)胞凋亡率較其他劑量組最高;RT-PCR和western-blotting結(jié)果提示雙氫