腹部火器傷后腦組織COX-2的表達及其與腦損傷相關機制的研究.pdf

1、目的：本實驗通過建立豬腹部腸管火器傷模型，觀察傷后大腦結構和功能的變化，傷后血漿內(nèi)毒素、TNF-α、IL-6水平、腦組織COX-2、PGE2的表達及腦細胞凋亡的動態(tài)變化，探討COX-2等因子在腹部腸管火器傷后繼發(fā)性腦損傷中的作用，旨在為腹部火器傷后繼發(fā)性腦損傷的預防和治療提供理論和實驗依據(jù)。 方法：采用健康長白仔豬42頭，隨機等分為7組：對照組和腹部腸管火器傷后1h、2h、4h、8h、12h和24h實驗組。實驗組在常溫常濕環(huán)境下

2、（溫度22℃-24℃，相對濕度50％-60％）麻醉后軍用54式手槍槍擊致傷（射擊點為臍水平后方2cm處右側腹壁皺襞下緣無毛區(qū)），建立腹部腸管火器傷模型。對照組除不致傷外，其余步驟與實驗組相同。各實驗組于傷后相應時間點取材，對照組回實驗室立即取材。在光鏡及電鏡下觀察各組腦組織學變化，采用顯色基質(zhì)鱟試劑法檢測各組血漿內(nèi)毒素水平；雙抗體夾心ELISA法測各組血漿TNF-α、IL-6水平及腦組織中的PGE2表達；采用Tunnel法測定腦細胞凋亡

3、指數(shù)；免疫組織化學圖像分析法測定各組腦組織COX-2的表達。 結果：（1）對照組及1h、2h、4h、8h組腦組織未見明顯的損傷性變化。12h、24h組腦組織于光鏡下可見神經(jīng)細胞層次不清、排列紊亂，細胞出現(xiàn)不同程度水腫，毛細血管擴張、腔內(nèi)紅細胞崩解，管腔周圍出現(xiàn)較大間隙，間質(zhì)疏松，呈網(wǎng)狀改變。（2）電鏡下對照組及1h、2h、4h組的神經(jīng)細胞結構完整，神經(jīng)細胞核核膜規(guī)則、完整，膠質(zhì)細胞無腫脹，毛細血管周圍無空泡變性，內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、核糖體分

4、布密集，線粒體內(nèi)峙規(guī)則；8h、12h、24h細胞輪廓模糊，間隙增大，細胞膜結構部分缺失，細胞質(zhì)呈空洞狀態(tài)，粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)擴張；高爾基體腫脹，器池及囊泡消失。線粒體腫脹、擴張及空泡樣變，突觸結構腫脹變性；細胞核染色質(zhì)凝集于核邊緣，核膜部分溶解，膠質(zhì)細胞腫脹加重，毛細血管管壁擴張，管腔狹窄，血管周圍呈空腔狀態(tài)溶酶體明顯增多，微管扭曲，可見微絲溶解。（3）實驗各組血漿內(nèi)毒素水平均明顯高于對照組（P<0.05），于傷后8h出現(xiàn)高峰，傷后12h仍維持

5、在高峰值水平。（4）實驗各組血漿TNF-α、IL-6水平均明顯高于對照組（P<0.05），均于傷后12h出現(xiàn)高峰。（5）傷后各組腦細胞凋亡指數(shù)明顯高于對照組（P<0.05），且隨時間延長而增加。（6）實驗組各組腦組織COX-2的表達均明顯高于對照組（P<0.05），且與損傷時間的長短成正相關。（7）實驗組各組腦組織PGE2的表達均明顯高于對照組（P<0.05），且與損傷時間的長短成正相關。（8）相關分析表明，傷后血漿內(nèi)毒素水平與血漿TN

6、F-α、IL-6水平、腦組織COX-2、PGE2的表達及腦細胞的凋亡均呈正相關，相關系數(shù)分別為0.908、0.911、0.548、0.716、0.892（P<0.05）。 結論：（1）腹部腸管火器傷導致大腦出現(xiàn)結構和功能的損傷性變化，隨著傷后時間的延長而加重。（2）腹部腸管火器傷后內(nèi)毒素血癥可刺激刺機體TNF-α、IL-6的產(chǎn)生、刺激腦組織COX-2、PGE2的表達以及腦細胞的凋亡，并通過這些炎癥因子介導腦損傷。復雜的內(nèi)毒素-細