肺心湯含藥血清對體外肺動脈平滑肌細(xì)胞增殖及PHD2、HIF-1α、VEGF的影響.pdf

1、【目的】：
　　本實(shí)驗(yàn)擬通過肺心湯含藥血清、PHD2siRNA聯(lián)合處理體外培養(yǎng)肺動脈平滑肌細(xì)胞，探討肺心湯含藥血清對低氧環(huán)境中離體大鼠肺動脈平滑肌細(xì)胞增殖及PHD2、HIF-1α、VEGF的影響。
　　【方法】：
　　第一步，慢病毒轉(zhuǎn)染體外培養(yǎng)的大鼠肺動脈平滑肌細(xì)胞；第二步，用經(jīng)證實(shí)含有肺心湯有效中藥成分群的大鼠含藥血清、正?？瞻籽迮囵B(yǎng)大鼠肺動脈平滑肌細(xì)胞；第三步，采用實(shí)時(shí)熒光定量（Real-time PCR）測定各

2、處理組HIF-1α、PHD2、VEGF、cyclinD1 RNA表達(dá)量，Western-blot測定各處理組HIF-1α、PHD2、VEGF、cyclinD1蛋白表達(dá)量，流式細(xì)胞術(shù)測定各處理組細(xì)胞周期變化。
　　【結(jié)果】：
　　1. Real-time PCR、Western-blot結(jié)果中，PHD2三組干擾序列，LV-1能明顯降低PHD2mRNA、蛋白表達(dá)。
　　2.低氧環(huán)境中，Real-time PCR、Weste

3、rn-blot結(jié)果中肺心湯含藥血清處理組與空白組比較，PHD2無明顯變化（P>0.05），HIF-1α、VEGF表達(dá)均表達(dá)明顯減少（P<0.05）
　　3. Real-time PCR、Western-blot結(jié)果中肺心湯含藥血清處理組與空白組比較， cyclinD1表達(dá)明顯減少，細(xì)胞周期檢測中肺心湯含藥血清處理組與空白組比較，增殖指數(shù)（Proliferation index，PI）明顯增加（P<0.05）。
　　【結(jié)論】：