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文檔簡介
1、目的:通過構(gòu)建結(jié)核分枝桿菌感染小鼠肺泡巨噬細胞模型,探討研究不同毒力的結(jié)核分枝桿菌對小鼠肺泡巨噬細胞鐵代謝調(diào)控作用機制。
方法:分別將結(jié)核分枝桿菌國際標(biāo)準(zhǔn)強毒株H37Rv菌株(H37Rv)、卡介苗菌株(BCG)以及無菌生理鹽水(空白對照)通過小鼠尾靜脈,注入小鼠體內(nèi)建立小鼠的感染模型,并在感染后的1d、3d、5d、7d、9d、11d、13d、15d提取小鼠肺泡巨噬細胞總蛋白,利用ELISA方法于模型建立成功后1d、3d、5d、
2、7d、9d、11d、13d、15d檢測各組小鼠肺泡巨噬細胞內(nèi)鐵蛋白、轉(zhuǎn)鐵蛋白受體、膜鐵轉(zhuǎn)運蛋白、乳鐵蛋白的表達,并分析其時相性變化,應(yīng)用Western blot技術(shù)比較分析各組小鼠肺泡巨噬細胞內(nèi)鐵蛋白、轉(zhuǎn)鐵蛋白受體于上述各時間點蛋白表達水平的時相性變化。
結(jié)果:⑴感染組小鼠肺泡巨噬細胞內(nèi)Fn表達量隨時間延長逐漸降低,在感染后7d、9d、11d最低,差異明顯,具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。⑵感染導(dǎo)致小鼠肺泡巨噬細胞內(nèi)的TfR表
3、達量逐漸增高,于感染后7d、9d、11d最高,并且H37Rv組高于 BCG組表達量,差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。⑶感染后的小鼠肺泡巨噬細胞內(nèi)FPN的表達量逐漸降低,于感染后5d、7d、9d最明顯,差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。⑷感染導(dǎo)致小鼠肺泡巨噬細胞分泌較高水平的Lf,與對照組比較在感染后7d、9d、11d升高最明顯,差異均具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。
結(jié)論:①小鼠肺泡巨噬細胞內(nèi)Fn含量下降,提示感染導(dǎo)致細
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