一種乙肝融合蛋白疫苗免疫效果探討.pdf

1、乙型肝炎病毒（HBV）是一種非致細胞病變的、有被膜的、雙鏈DNA病毒，是急慢性肝炎和肝細胞癌的主要致病因子?，F在全世界有超過20億的人被HBV感染過，其中有3.5億為慢性攜帶者，而中國就達1.2億。盡管導致HBV慢性感染的因素現在還不十分清楚，越來越多的證據表明，細胞介導的免疫（CMI）響應，特別是抗原特異性的細胞毒性T淋巴細胞（CTL）在控制HBV感染的過程中發(fā)揮著十分重要的作用。故在乙肝疫苗研究中需要注意所使用的疫苗能否有效地激起機

2、體的CTL反應，以何種途徑激起CTL反應，是否能夠在體外有效地評價此種CTL反應。經過基因工程改造脫毒的炭疽桿菌致死因子片斷（LFn）是一種理想的抗原投遞工具，能夠安全有效地將與之融合的抗原帶入到抗原呈遞細胞（APC）的細胞質中。已經證明，與LFn融合的HIV抗原能通過MHCⅠ類和Ⅱ類途徑同時誘導出特異性的CD4+和CD8+T細胞介導的免疫響應。本實驗將HBV完整膜抗原以及涵蓋全長的20個截短基因片段克隆至表達載體上，并表達純化這一系列

3、融合蛋白，進行Balb/c小鼠以及中國恒和猴的免疫注射工作，使用IFN-γELISPOT實驗檢測細胞免疫響應水平，并評價HBV全長膜蛋白的免疫原性以及用表達的小蛋白作為刺激物的可行性。
　　 主要組織抗原（Madior Histocompatibility Complex）MHC分子在所有細胞表面均有表達，并擔任抗原肽呈遞的重要功能，在免疫系統(tǒng)的特異性識別方面發(fā)揮重要作用。中國具有廣泛的免疫學動物模型-中國恒河猴資源，其遺傳背景

4、尤其MHC-Ⅰ類分子的情況尚不太清楚。本實驗使用SSP-PCR（Sequence-Specific Primer-PCR）的方法在約550只中國恒河猴中篩選可能具有呈遞HBV全長膜蛋白表位的基因型Mamu-A*11的基因型，并將結果與印度恒河猴中此種基因型出現頻率進行比較。
　　 本文主要工作集中在尋找HBV全長膜蛋白中國恒河猴MHC-Ⅰ類分子限制性表位，并同時進行中國恒河猴的MHC-Ⅰ類基因的分型工作，以期建立MHC基因與限制