胃癌肝轉(zhuǎn)移早期預(yù)測(cè)因子的臨床及實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、在我國(guó)，胃癌發(fā)病率和死亡率均很高，胃癌轉(zhuǎn)移到肝臟時(shí)有發(fā)生，是造成胃癌死亡的相關(guān)因素。據(jù)文獻(xiàn)報(bào)道，胃癌患者發(fā)現(xiàn)肝轉(zhuǎn)移的比例大約在5％-9％。由于對(duì)胃癌開(kāi)展早期的篩查國(guó)家很少，而胃癌本身癥狀比較隱匿，導(dǎo)致大部分患者就診時(shí)多為晚期，并且這些病人常常伴有其他部位遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移，因而導(dǎo)致根治性手術(shù)切除率低、術(shù)后轉(zhuǎn)移復(fù)發(fā)率高、患者的生存率很不樂(lè)觀。和結(jié)腸癌肝轉(zhuǎn)移行肝切除術(shù)的積極態(tài)度進(jìn)行對(duì)比，胃癌肝轉(zhuǎn)移手術(shù)治療仍存在較大爭(zhēng)議，切除率較低，造成這種原因通常是

2、因?yàn)楦无D(zhuǎn)移只是胃癌遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移中的一部分，同時(shí)還包括肝外轉(zhuǎn)移如淋巴結(jié)的廣泛種植、腹膜種植，以及周?chē)K器、大血管的浸潤(rùn)。因此，研究與胃癌肝轉(zhuǎn)移密切相關(guān)的臨床病理因素，及早發(fā)現(xiàn)并采取積極對(duì)策，無(wú)疑是提高胃癌肝轉(zhuǎn)移的診治水平和生存率的關(guān)鍵所在。
　　 胃癌肝轉(zhuǎn)移是一個(gè)多步驟、多因素參與的極其復(fù)雜的過(guò)程，經(jīng)過(guò)癌細(xì)胞從原發(fā)癌灶脫離、細(xì)胞外基質(zhì)的破壞、脈管浸潤(rùn)、轉(zhuǎn)移臟器新生血管形成再增殖等過(guò)程。在此過(guò)程中各自的粘附分子、血管新生因子、細(xì)胞外金屬

3、基質(zhì)蛋白酶等多種癌基因出現(xiàn)異常。目前研究認(rèn)為癌胚抗原(CEA)、甲胎蛋白(AFP)、肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體(C-met)、基質(zhì)金屬蛋白酶(MMP)、環(huán)氧化酶2(COX-2)、血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(VEGF)、微血管密度(MVD)及E-鈣粘素(E-cad)等在胃癌的侵襲、轉(zhuǎn)移中起著重要的作用。如何從眾多的影響因素中篩選出與胃癌肝轉(zhuǎn)移聯(lián)系最為緊密的因素作為預(yù)測(cè)胃癌肝轉(zhuǎn)移的有效指標(biāo)有著重要的臨床意義，也是我們臨床醫(yī)生迫切希望解決的問(wèn)題。
　　

4、 本研究擬通過(guò)對(duì)胃癌患者臨床資料的分析及與胃癌肝轉(zhuǎn)移相關(guān)生物分子的檢測(cè)，以期能闡明各種因素與胃癌肝轉(zhuǎn)移之間的聯(lián)系，找到較為準(zhǔn)確的預(yù)測(cè)胃癌肝轉(zhuǎn)移的方法。因此，我們的實(shí)驗(yàn)研究設(shè)計(jì)如下:
　　 (1)通過(guò)回顧性的病例研究，探討胃癌術(shù)后肝轉(zhuǎn)移與相關(guān)的臨床病理因素之間的聯(lián)系。
　　 (2)檢測(cè)CEA、AFP、C-met、MMP、COX-2、VEGF、MVD和E-cad等8種分子生物學(xué)指標(biāo)在胃癌中的表達(dá)，并用統(tǒng)計(jì)學(xué)的方法篩選出與胃癌

5、肝轉(zhuǎn)移聯(lián)系最為密切的因子。
　　 (3)聯(lián)合檢測(cè)以上實(shí)驗(yàn)篩選出的相關(guān)因子在胃癌中的表達(dá)，并進(jìn)行一系列的診斷試驗(yàn)，對(duì)各種診斷試驗(yàn)進(jìn)行評(píng)價(jià)，尋找較為理想的胃癌肝轉(zhuǎn)移的診斷模型。
　　 第一章胃癌肝轉(zhuǎn)移臨床病理特點(diǎn)分析
　　 目的:胃癌肝轉(zhuǎn)移作為最常見(jiàn)的轉(zhuǎn)移途徑之一，尚缺乏有效的預(yù)測(cè)、評(píng)估指標(biāo)，
　　 本文即探討胃癌肝轉(zhuǎn)移與其臨床病理因素之間的關(guān)系，以便于評(píng)估胃癌肝轉(zhuǎn)移危險(xiǎn)因素，尋找潛在的危險(xiǎn)因子。
　　

6、 方法:回顧性分析2002年5月至2012年5月間收治的47例胃癌肝轉(zhuǎn)移患者的病例資料隨訪(fǎng)，并與同期收治的無(wú)轉(zhuǎn)移的745例胃癌病例資料進(jìn)行比較，分析影響肝轉(zhuǎn)移的臨床病理因素。
　　 結(jié)果:①792例胃癌患者發(fā)生肝轉(zhuǎn)移47例，占5.9％(47/792)。②單因素分析結(jié)果顯示Borrmann分型(x2=11.2，P=0.019)、浸潤(rùn)深度(x2=4，P=0.042)、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移(x2=13.9，P=0.000)、腹膜侵犯(x2=7

7、.7，P=0.028)和脈管癌栓（x2=20.4，P=0.000）等5項(xiàng)指標(biāo)與胃癌肝轉(zhuǎn)移有關(guān)。③多因素logistic回歸分析發(fā)現(xiàn)，脈管浸潤(rùn)(OR=8.975，P=0.000)、漿膜浸潤(rùn)（OR=3.657，P=0.022）、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移(OR=6.752，P=0.000)等3項(xiàng)指標(biāo)與胃癌肝轉(zhuǎn)移有關(guān)，是影響胃癌肝轉(zhuǎn)移最重要的因素。④單因素分析結(jié)果顯示，性別、年齡、腫瘤部位、大體形態(tài)和腫瘤長(zhǎng)徑與胃癌肝轉(zhuǎn)移無(wú)關(guān)。
　　 結(jié)論:①腹膜侵犯

8、、脈管浸潤(rùn)、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、以及腫瘤Bormann分型、浸潤(rùn)深度等5項(xiàng)指標(biāo)都與胃癌肝轉(zhuǎn)移有關(guān)。②脈管浸潤(rùn)、浸潤(rùn)深度和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移等3項(xiàng)指標(biāo)是影響胃癌肝轉(zhuǎn)移的重要因素。
　　 第二章胃癌肝轉(zhuǎn)移潛在危險(xiǎn)因子的多因素分析
　　 目的:聯(lián)合檢測(cè)胃癌的多個(gè)免疫組化指標(biāo)，探討各指標(biāo)與胃癌肝轉(zhuǎn)移的關(guān)系。
　　 方法:用免疫組織化學(xué)（SP法）檢測(cè)80例胃癌術(shù)后的腫瘤組織中CEA、AFP、C-met、MMP、COX-2、VEGF、MVD

9、和E-cad的表達(dá)，t檢驗(yàn)分別分析各指標(biāo)與胃癌肝轉(zhuǎn)移的關(guān)系，Logistic回歸進(jìn)行多因素分析。
　　 結(jié)果:①CEA、AFP、VEGF、MVD和E-cad等5項(xiàng)免疫組化指標(biāo)在肝轉(zhuǎn)移組和無(wú)肝轉(zhuǎn)移組的表達(dá)有顯著性差異(P＜0.05)，而C-met、MMP11和COX-2在兩組中表達(dá)無(wú)顯著性差異（P＞0.05）。②逐步Logistic回歸多因素分析（α入=0.10，α出=0.15）顯示，CEA、VEGF和E-cad等3項(xiàng)指標(biāo)進(jìn)入模型

10、方程，可解釋肝轉(zhuǎn)移發(fā)生原因的71.8％(r2=0.718)。
　　 結(jié)論:①8項(xiàng)免疫組化指標(biāo)中，CEA、VEGF和E-cad與胃癌肝轉(zhuǎn)移相關(guān)。②CEA、COX-2和MVD可作為預(yù)測(cè)胃癌肝轉(zhuǎn)移的候選指標(biāo)。
　　 第三章聯(lián)合檢測(cè)CEA、VEGF和E-cad mRNA表達(dá)在胃癌肝轉(zhuǎn)移中的意義
　　 目的:在接受根治性切除術(shù)的胃癌病人中13.0％-30.0％將最終出現(xiàn)肝轉(zhuǎn)移。為提高再手術(shù)切除率，早期預(yù)測(cè)和診斷胃癌術(shù)后肝轉(zhuǎn)

11、移就尤為必要。在第二章研究基礎(chǔ)上，進(jìn)一步探討CEA、VEGF和E-cad的mRNA表達(dá)與胃癌術(shù)后肝轉(zhuǎn)移的關(guān)系，以評(píng)價(jià)它們?cè)陬A(yù)測(cè)胃癌肝轉(zhuǎn)移中的作用以及臨床應(yīng)用的可行性。
　　 方法:RT-PCR法檢測(cè)280例胃癌患者腫瘤標(biāo)本中CEA、VEGF和E-cad的mRNA的表達(dá)水平，以CEA、VEGF和E-cad為指標(biāo)預(yù)測(cè)胃癌術(shù)后肝轉(zhuǎn)移的發(fā)生，并以單指標(biāo)法、平行試驗(yàn)和系列試驗(yàn)評(píng)價(jià)該診斷試驗(yàn)。
　　 結(jié)果:①280例行根治術(shù)的胃癌患

12、者中，根據(jù)診斷金標(biāo)準(zhǔn)，術(shù)后4年內(nèi)有39例發(fā)生肝轉(zhuǎn)移(13.9％)。②CEAmRNA表達(dá)呈陽(yáng)性230例，VEGFmRNA表達(dá)呈陽(yáng)性208例，E-cadmRNA表達(dá)呈陽(yáng)性192例。③單獨(dú)以CEA為術(shù)后肝轉(zhuǎn)移預(yù)測(cè)指標(biāo)，診斷實(shí)驗(yàn)靈敏度為100％，特異度為20.7％;單獨(dú)以VEGF為預(yù)測(cè)指標(biāo)，診斷實(shí)驗(yàn)靈敏度為92.1％，特異度為28.6％;單獨(dú)以E-cad為預(yù)測(cè)指標(biāo)，診斷實(shí)驗(yàn)靈敏度為87.1％，特異度為37.4％。④以三指標(biāo)聯(lián)合檢測(cè)平行實(shí)驗(yàn)，診斷

13、靈敏度為100％，特異度為9.13％;若以三指標(biāo)聯(lián)合檢測(cè)系列試驗(yàn)，診斷靈敏度為89.7％，特異度為88.3％。
　　 結(jié)論:①分別以CEA、VEGF和E-cad單獨(dú)為胃癌術(shù)后肝轉(zhuǎn)移預(yù)測(cè)指標(biāo)時(shí)，靈敏度和特異度不全滿(mǎn)意，分別為（100％和20.7％，92.1％和28.6％，87.1％和37.4％），因此不適合以單一指標(biāo)預(yù)測(cè)胃癌術(shù)后肝轉(zhuǎn)移的發(fā)生。②三指標(biāo)聯(lián)合檢測(cè)平行實(shí)驗(yàn)時(shí)，靈敏度和特異度分別為100％和9.13％，特異度有較大降低，因