生物鐘基因Bmall、Per2在兒童急性淋巴細(xì)胞白血病的表達(dá)及意義.pdf

1、研究背景：
　　急性淋巴細(xì)胞白血病(acute lymphoid leukemia，ALL)是兒童時(shí)期最常見(jiàn)的血液腫瘤，占兒童白血病的70％左右，目前發(fā)病機(jī)制尚不明確。而有研究發(fā)現(xiàn)控制生物節(jié)律的內(nèi)在生物鐘基因表達(dá)異常與腫瘤的發(fā)生相關(guān)，在急慢性髓系白血病及非霍奇金淋巴瘤中都有檢測(cè)到鐘基因表達(dá)異常?，F(xiàn)有關(guān)鐘基因表達(dá)與急性淋巴細(xì)胞白血病發(fā)病關(guān)系的研究較少見(jiàn)。
　　研究目的：
　　通過(guò)對(duì)急性淋巴細(xì)胞白血病患兒生物鐘基因Bmal

2、1、Per2基因表達(dá)的檢測(cè)，探討生物鐘基因在兒童急性淋巴細(xì)胞白血病中的表達(dá)，初步揭示鐘基因在急性淋巴細(xì)胞白血病發(fā)病中的作用。
　　研究對(duì)象和方法：
　　1.選擇鄭州大學(xué)第一附屬醫(yī)院兒童血液科ALL初診未治療患兒30例為實(shí)驗(yàn)組1（ALL初治組），ALL化療完全緩解患兒30例為實(shí)驗(yàn)組2（ALL-CR組），體檢中心體檢兒童30例為健康對(duì)照組。實(shí)驗(yàn)組入選標(biāo)準(zhǔn)參照2006年“兒童急性淋巴細(xì)胞白血病診療建議（第3次修訂草案）”診斷分型標(biāo)

3、準(zhǔn)，實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組均排除肥胖、心血管疾病、腫瘤及睡眠周期紊亂等影響鐘基因表達(dá)的疾病。
　　2.于晨06:00用無(wú)菌注射器分別抽取實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組空腹靜脈血各2ml，并迅速打入EDTA抗凝管中，輕輕搖勻。
　　3.應(yīng)用密度梯度離心法分離外周血單個(gè)核細(xì)胞，吸取白膜層。
　　4.按照Trizol試劑說(shuō)明書(shū)提取外周血單個(gè)核細(xì)胞總RNA，檢測(cè)RNA的純度及完整性;應(yīng)用反轉(zhuǎn)錄試劑盒合成eDNA;采用Real-time PCR測(cè)定Bm

4、al1 mRNA、Per2 mRNA的表達(dá)。
　　結(jié)果：
　　1.ALL初治組患兒Bmal1 mRNA、Per2 mRNA表達(dá)與健康對(duì)照組比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，ALL初治組患兒Per2 mRNA表達(dá)量水平均較對(duì)照組減低，Bmal1 mRNA表達(dá)水平均較健康對(duì)照組增高。
　　2.ALL-CR組患兒Bmal1 mRNA、Per2 mRNA表達(dá)與健康對(duì)照組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，ALL-CR組

5、Bmal1 mRNA、Per2 mRNA表達(dá)均較健康對(duì)照組減低。
　　3.ALL-CR組患兒Bmal1 mRNA、Per2 mRNA表達(dá)與ALL初治組比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，ALL-CR組Bmal1 mRNA、Per2 mRNA表達(dá)均較ALL初治組減低。
　　結(jié)論：
　　1.在兒童ALL外周血單個(gè)核細(xì)胞中存在生物鐘基因Bmal1 mRNA、Per2 mRNA異常表達(dá)，表明其可能在兒童ALL的發(fā)生、發(fā)展中