鐵牛七及其復方酊劑對兔膝骨性關(guān)節(jié)炎關(guān)節(jié)液TNF-α的影響.pdf

1、目的：探討鐵牛七及其復方酊劑對兔膝關(guān)節(jié)骨性關(guān)節(jié)炎細胞因子TNF-α含量的影響。
　　方法：隨機將60只成年家兔（雌雄各半）分為五組，即空白對照組、生理鹽水組、復方鐵牛七酊劑組、鐵牛七酊劑組、消腫止痛酊劑組。除空白組外，其余各組均復制KOA模型。參照日本鬼頭康彥的造模方法,將含5％木瓜蛋白酶化合物的生理鹽水0.5ml注入兔膝關(guān)節(jié)腔內(nèi),每隔3天注射1次(即第1d、4d、7d)，連續(xù)3次。兩周后檢驗造模是否成功。造模成功后開始涂藥，1日

2、2次，連續(xù)用藥14天。實驗完成后，在兔膝關(guān)節(jié)腔內(nèi)注入0.5ml生理鹽水，活動兔膝關(guān)節(jié)10秒鐘后，抽取關(guān)節(jié)液0.5ml并離心，于-20℃冰箱中保存，待測。TNF-α的含量用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)檢測。關(guān)節(jié)液抽取完畢后用空氣栓塞法將實驗動物全部處死，打開膝關(guān)節(jié)，觀察關(guān)節(jié)形態(tài)改變；切取滑膜組織，置于10％的甲醛溶液中固定，脫水后石蠟包埋、切片，HE染色，光學顯微鏡觀察。
　　結(jié)果：造模后，觀察可見造模動物的活動明顯減少，

3、膝關(guān)節(jié)腫大，屈伸受限，肢體跛行，說明造模成功。連續(xù)擦藥14天后檢測關(guān)節(jié)液，鐵牛七及復方酊劑組中兔膝關(guān)節(jié)關(guān)節(jié)液中TNF-α的含量低于其它對照組，各組間比較，P＜0.05，有統(tǒng)計學意義。實驗完畢后用空氣栓塞法將實驗動物處死，打開膝關(guān)節(jié)，見B、C、D、E組關(guān)節(jié)增粗，關(guān)節(jié)滑膜增生，關(guān)節(jié)軟骨變薄，關(guān)節(jié)面粗糙，脛骨平臺內(nèi)外側(cè)偶見骨贅形成，以 B組增生明顯，而C、D組與B組比較骨質(zhì)增生個體少；光學顯微鏡下，C組及D組的滑膜細胞增生及炎癥反應均較B組有