CD147、MMP-9和p-ERK在乳腺癌中的表達(dá)及臨床意義.pdf

1、本研究試圖通過(guò)免疫組化方法檢測(cè)乳腺浸潤(rùn)性導(dǎo)管癌(invasiveductalcarcinoma，IDC)中MMP-9及其誘導(dǎo)因子CD147和p-ERK的表達(dá)水平，結(jié)合臨床病理指標(biāo)以探討CD147與MMP-9和p-ERK在乳腺癌表達(dá)中的相關(guān)性，以及與乳腺癌浸潤(rùn)和轉(zhuǎn)移的關(guān)系。 研究材料：乳腺癌組織蠟塊96例來(lái)源于浙江大學(xué)醫(yī)學(xué)院第二附屬醫(yī)院病理科，為1992年1月～2000年12月間外科手術(shù)標(biāo)本，診斷為乳腺浸潤(rùn)性導(dǎo)管癌(invasiv

2、eductalcarcinoma，IDC)，每例均有詳細(xì)的臨床資料、手術(shù)記錄及5年以上的隨訪結(jié)果。術(shù)前均未接受化療和放療?；颊吣挲g28～84歲，平均53.5歲。病理學(xué)類型均為IDC；采用Scarfff-Bloom-Richardson分級(jí)法進(jìn)行組織學(xué)分級(jí)，Ⅰ級(jí)(高分化)26例，Ⅱ級(jí)(中分化)25例，Ⅲ級(jí)(低分化)45例。采用國(guó)際抗癌聯(lián)盟(1987)的TNM分期，分為Ⅰ期22例，Ⅱ期44例，Ⅲ期30例。96例中有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者48例，無(wú)轉(zhuǎn)移

3、者48例；生存時(shí)間≥5年者68例，＜5年者28例，5年生存率為70.8％(68/96)。34例乳腺導(dǎo)管內(nèi)癌，10例乳腺腺病為同期外檢標(biāo)本。 研究方法：采用免疫組織化學(xué)EnvisioaTM二步法，4um厚切片，62℃烤片4h，脫蠟和水化后，置于3％H2O2內(nèi)5分鐘滅活內(nèi)源性過(guò)氧化物酶。用0.01mol/L(PH6.0)枸櫞酸緩沖液水浴加熱抗原修復(fù)，95～100℃20分鐘，室溫冷卻后PBS沖洗，滴加一抗，室溫孵育2h，PBS沖洗，2

4、分鐘×3次；滴加二抗-HRP多聚體，室溫孵育30分鐘，PBS沖洗2分鐘×3次；DAB顯色，蒸餾水沖洗、蘇木素襯染，梯度乙醇脫水，二甲苯透明，中性樹酯封固。PBS代替一抗作陰性對(duì)照，口腔鱗癌組織切片作陽(yáng)性對(duì)照。 組化結(jié)果判斷：CD147分子蛋白表達(dá)定位于腫瘤細(xì)胞的細(xì)胞膜和細(xì)胞漿；MMP-9在細(xì)胞漿；p-ERK在細(xì)胞核和/或細(xì)胞漿。在高倍鏡下(×400)對(duì)每張切片隨機(jī)選擇5個(gè)視野，計(jì)數(shù)200個(gè)細(xì)胞/視野，共計(jì)1000個(gè)，以未見陽(yáng)性細(xì)

5、胞為陰性-，CD147和MMP-9以陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)＜10％為+；10～50％為++；＞50％為+++。p-ERK以陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)＜10％為+；≥10％為++。 統(tǒng)計(jì)結(jié)果：采用SPSS11.0統(tǒng)計(jì)軟件，不同組間比較用卡方檢驗(yàn)，應(yīng)用Spearman等級(jí)相關(guān)檢驗(yàn)對(duì)CD147、MMP-9和P-ERK表達(dá)與臨床病理指標(biāo)的相關(guān)性及其三者之間相關(guān)性進(jìn)行分析。 研究結(jié)果：CD147、MMP-9和p-ERK在IDC中陽(yáng)性表達(dá)率分別為59.4％、5

6、4.2％和52.1％，高于DCIS35.3％、32.6％和29.4％，且有顯著差異性(P＜0.05)。乳腺腺病均未見表達(dá)。乳腺IDC和DCIS組與對(duì)照組比較均有差異性(P＜0.05)。CD147和MMP-9表達(dá)與乳腺IDC的腫塊大小(r=0.336；0.306，P＜0.05)、TNM分期(r=0.384；0.308，P＜0.01)、組織學(xué)分級(jí)(r=0.272；0.323，P＜0.05)、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移(r=0.276；0.251，P＜0.0

7、5)和術(shù)后5年生存率(r=0.225；0.251，P＜0.05)均呈正相關(guān)。CD147與MMP-9蛋白的表達(dá)與患者年齡無(wú)關(guān)。p-ERK蛋白則與組織學(xué)分級(jí)(r=0.301，P＜0.05)相關(guān)，與其它均無(wú)關(guān)。Spearman相關(guān)分析發(fā)現(xiàn)CD147與MMP-9的表達(dá)呈正相關(guān)(r=0.261，P＜0.05)，p-ERK與CD147和MMP-9蛋白的表達(dá)均無(wú)相關(guān)性(r=0.013；0.122，P＞0.05)。 研究結(jié)論：1.CD147及M

8、MP-9在乳腺浸潤(rùn)性導(dǎo)管癌陽(yáng)性表達(dá)率明顯高于導(dǎo)管內(nèi)癌，二者又均高于乳腺腺病，且差異有顯著性。2.乳腺浸潤(rùn)性導(dǎo)管癌中CD147與MMP-9表達(dá)與乳腺癌TNM分期、腫瘤大小、組織學(xué)分級(jí)及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和術(shù)后五年生存率密切相關(guān)。3.隨著病變由原位癌進(jìn)展到浸潤(rùn)性導(dǎo)管癌，及浸潤(rùn)性導(dǎo)管癌分級(jí)的增高，p-ERK的表達(dá)和活性也增高，差異有顯著性。4.CD147與5MMP-9有相關(guān)性，而p-ERK與CD147、MMP-9在乳腺IDC組織表達(dá)程度均無(wú)顯著相關(guān)性