壓力性尿失禁患者陰道前壁病理形態(tài)學(xué)特征分析及平滑肌細(xì)胞凋亡檢測.pdf

1、目的:
　　分析壓力性尿失禁患者陰道前壁病理形態(tài)學(xué)特征,并探討壓力性尿失禁患者陰道前壁平滑肌細(xì)胞凋亡發(fā)生情況及意義。
　　方法:
　　以南京軍區(qū)福州總醫(yī)院婦產(chǎn)科2012年6月~2012年11月收治的壓力性尿失禁患者30例(其中15例合并盆腔器官脫垂)和同期因婦科良性疾病行子宮切除的患者15例為研究對象。將所有的研究對象分為正常對照組(n=15例)、單純尿失禁組(SUI組,n=15例)及尿失禁合并脫垂組(SUI+POP組

2、,n=15例),手術(shù)過程中,取近似相同部位陰道前壁組織標(biāo)本。應(yīng)用HE染色、Masson三色染色、醛品紅染色、CD31、S-100及actin免疫組化染色多種染色方法,在多個不連續(xù)視野觀察兩組患者陰道前壁的顯微結(jié)構(gòu)及病理形態(tài)學(xué)特征,同時采用ImageProPlus6.0圖像分析軟件定量分析兩組間肌層結(jié)締組織、平滑肌組織、血管及神經(jīng)的分布及構(gòu)成差異,并分析其與年齡、體重指數(shù)、絕經(jīng)時限、合并脫垂程度及VLPP等臨床參數(shù)相關(guān)性。在此基礎(chǔ)上,采用

3、TUNEL凋亡試劑盒檢測三組間平滑肌細(xì)胞凋亡情況,RT-qPCR及Westernblot檢測線粒體凋亡途徑中的凋亡相關(guān)蛋白P53、BCl-2及Bax的mRNA及其蛋白表達(dá)情況,并分析凋亡相關(guān)蛋白的表達(dá)相關(guān)性及P53、Bcl-2、Bax、BCl-2/Bax與平滑肌凋亡指數(shù)、患者年齡、體重指數(shù)、絕經(jīng)時限、合并脫垂程度及VLPP等臨床參數(shù)的相關(guān)性。
　　結(jié)果:
　　(1)各種染色結(jié)果顯示:
　　相對于正常對照組,壓力性尿失禁

4、患者陰道前壁存在明顯的病理形態(tài)學(xué)變化,主要表現(xiàn)為肌層較薄,面積較小,肌束細(xì)碎,肌纖維排列紊亂;膠原纖維散在分布,分布不規(guī)則;彈性纖維分布較少,且存在不同程度的斷裂;外周神經(jīng)纖維數(shù)量較少,且直徑較小等。
　　(2)定量分析結(jié)果顯示:
　?、僬φ战M、SUI組及SUI+POP組肌層神經(jīng)纖維數(shù)量分別為(3.1±1.4),(2.2±1.3)和(1.8±1.0)個,其中SUI組和SUI+POP組組間差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05),

5、但SUI組、SUI+POP組與正常對照組之間的差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05);
　?、谡φ战M、SUI組及SUI+POP組肌層神經(jīng)纖維直徑分別為(42.1±7.2),(33.2±6.8)和(31.8±4.7)μm,其中SUI組和SUI+POP組組間差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05),但SUI組、SUI+POP組與正常對照組之間的差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05);
　?、壅φ战M、SUI組及SUI+POP組肌層血管面積分別

6、為(2.2±1.0),(2.5±1.1)和(2.4±1.2)％,三組組間差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05);
　　④正常對照組、SUI組及SUI+POP組肌層非血管平滑肌面積分別為(56.9±9.4),(47.7±6.9)和(44.3±6.0)%,其中SUI組和SUI+POP組組間差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05),但SUI組、SUI+POP組與正常對照組之間的差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05);
　　⑤正常對照組、SUI組及SU

7、I+POP組肌層結(jié)締組織面積分別為(40.3±8.4),(50.7±7.3)和(54.9±6.6)%,其中SUI組和SUI+POP組組間差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05),但SUI組、SUI+POP組與正常對照組之間的差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05);
　?、揸幍狼氨诩由窠?jīng)纖維數(shù)量和神經(jīng)纖維直徑與患者年齡、孕次、陰道分娩次數(shù)、絕經(jīng)年限、VLPP及合并脫垂分度存在相關(guān)性(P<0.05);陰道前壁肌層中的血管面積與患者年齡、孕次、陰道

8、分娩次數(shù)及絕經(jīng)年限存在相關(guān)性(P<0.05);陰道前壁肌層中的非血管平滑肌面積與患者年齡、體重指數(shù)、孕次、陰道分娩次數(shù)、絕經(jīng)年限、VLPP及合并脫垂分度存在相關(guān)性(P<0.05);
　　(3)TUNEL及凋亡相關(guān)蛋白表達(dá)檢測結(jié)果顯示:
　　①正常對照組、SUI組及SUI+POP組凋亡指數(shù)分別為(9.8±2.2),(18.1±4.7)和(20.2±5.4),其中SUI組和SUI+POP組組間差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05),但

9、SUI組、SUI+POP組與正常對照組之間的差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05);
　?、谡φ战M、SUI組及SUI+POP組凋亡相關(guān)蛋白P53、Bcl-2及Bax的mRNA相對表達(dá)量分別為(0.99±0.10),(1.02±0.09),(1.01±0.08);(1.37±0.27),(0.73±0.16),(1.33±0.20);(1.52±0.21),(0.68±0.12),(1.41±0.16),其中SUI組和SUI+POP組

10、組間差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05),但SUI組、SUI+POP組與正常對照組之間的差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05);
　　③正常對照組、SUI組及SUI+POP組凋亡相關(guān)蛋白P53、Bcl-2及Bax的相對表達(dá)量分別為(0.52±0.16),(0.77±0.19),(0.83±0.21);(0.81±0.22),(0.53±0.14),(0.48±0.12);(0.44±0.14),(0.67±0.22),(0.83±0.16)

11、。Bcl-2/Bax比值分別為(1.93±0.46),(0.93±0.49),(0.60±0.19),其中SUI組和SUI+POP組上述指標(biāo)組間差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05),但SUI組、SUI+POP組與正常對照組之間的差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05);
　　④P53、Bcl-2、Bax、Bcl-2/Bax及凋亡指數(shù)之間存在相關(guān)性(P<0.05);P53蛋白表達(dá)與體重指數(shù)存在相關(guān)性(P<0.05);Bcl-2蛋白表達(dá)與年齡、絕

12、經(jīng)年限存在相關(guān)性(P<0.05);Bax蛋白量與年齡、孕次、陰道分娩次數(shù)、VLPP及合并脫垂分度存在相關(guān)性(P<0.05);Bcl-2/Bax及凋亡指數(shù)與年齡、BMI、孕次、陰道分娩、絕經(jīng)年限、VLPP、合并脫垂分度存在相關(guān)性(P<0.05)。
　　結(jié)論:
　　(1)壓力性尿失禁患者陰道前壁存在神經(jīng)及肌肉的退行性病變,可能作為其發(fā)生發(fā)展的潛在病理機(jī)制;
　　(1)壓力性尿失禁患者陰道前壁肌層中非血管平滑肌細(xì)胞凋亡增加,